每个ELISA试验都要做标准曲线，实验新手刚接触ELISA实验的时基本上都是不知所措，尤其是实验做完后需要分析数据绘制标准曲线图更是茫然。鉴于经常有实验新手客户向我司技术部反映标准曲线图绘制问题，欧阳技术根据自身多年的工作经验详细整理了绘制标曲的步骤流程，供广大新老客户参考。
1、拟和曲线：
输入先进行： 浓度值， 如0 10 50 100 400
输入第二行：该浓度下的调整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据，用插入里的图表按钮，进入图表向导，在“标准类型”中选择“xy散点图”；在“子图表类型”中选择“折线散点图”，按“下一步”；选择“系列产生在行”，按“下一步”；数据标志，可以填写：如数据y轴，OD值；数据x轴，浓度；按下一步，点击完成。可得曲线图。
单击曲线，按右键，选择“添加趋势线”，在类型中，选择多项式；在选项中，选择显示公式，选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法： 双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。
2、计算浓度：
*次实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例，已知OD值，计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，所以可以得到：
4E-05x2 －0.026x ＋y＝0
ax2 ＋bx ＋y＝0
a＝4E-05；b＝ －0.026；
x＝（－b－（b*b－4ay）（平方根）） /（2*a）
代入a，b，和y值，得
x＝（0.026－（0.026*0.026-0.00016*y）（平方根））/（2*0.00004）
在excel里可以用以下公式表示：
x＝（0.026-EXP（LN（0.026*0.026-0.00016*y）/2））/（2*0.00004）
通用公式为：
x＝（－b－EXP（LN（b*b－4ay）/2））/（2*a）
