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大鼠细胞的因子检测,有没有推荐的刺激方法?

上海恒远生化试剂网

2015/11/24 10:51:38

对于大鼠细胞的因子检测,有没有推荐的刺激方法?

大鼠细胞的因子检测我们一般采用Elisa方法,本章小编为您推荐更刺激的方法。

 由于大鼠细胞在培养 2-5 天之后缺乏生存能力,细胞因子的刺激非常困难。内部检测时,通常只能得到 30-60%的存活率。如下提示可保证细胞存活率:以全淋巴结细胞代替 CD4 细胞。

  与重组的 IL-2 和 IL-4 共孵育时,在第二天观察一下培养液。如果细胞已长满,一分二之后换取含有重组 IL-2 和 IL-4 的新鲜培养液。也可以在两天后停止培养,用 PMA 和离子霉素刺激。培养两天会使细胞因子分泌更少,但是细胞活性更好。

上海恒远生物建议:选择性价比高的Elisa试剂盒,应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价:
1、灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的zui低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力;
2、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标;
3、精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围;
4、准确度:通过添加回收实验进行评价;
5、简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单;
6、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性;
7、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理;

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