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CHO细胞培养说明

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2016/1/6 12:18:01

                      CHO细胞培养说明

产品名称:CHO细胞

中文名称:中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary)

种属:仓鼠

组织来源 卵巢

生长状态 贴壁生长

细胞形态 上皮样

CHO细胞具有不死性,可以传代百代以上

CHO细胞培养

1、培养条件:

培养基类型:DMEM(Hyclone SH30243.01)培养基

FBS(GIBCO 16000-044): 10%

抗生素:双抗

培养条件:37℃,CO2: 5%

2、传代方法:

收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态:

如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液,继续培养。

如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法:

1 )弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2 )加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。

1)直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2)离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内, 1000rpm,5分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。

3、冻存方法:

70% *培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。

储存:液氮中长期保存。

4、注意事项

1 )观察细胞在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。

2 )在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3 )收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请拍照并在一周内与我们。

 

来源:慧颖细胞库 整理编辑

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