C6细胞大鼠脑胶质瘤 操作说明
C6细胞简介：
产品名称：C6细胞
中文名称：大鼠脑胶质瘤
来源：大鼠脑 胶质瘤细胞
细胞形态：上皮样
生长状态：贴壁生长
培养基：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培养条件：37℃ 5% CO2
消化条件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA 溶液，消化 5-10min
传代比例：1：2-1：3
换液时间：2-3 天换液一次
冻存液比例：85%培养基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO
冻存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存
C6细胞大鼠脑胶质瘤 操作说明：
悬浮生长细胞的传代：直接直接吸去或离心后吸去培养上清液，用新鲜培养液悬浮细胞，1：3或1：5稀释细胞后，分瓶继续培养。
贴壁生长细胞的传代：吸去培养液，用PBS洗涤细胞一次，加入消化液，在37℃中消化约3～10分钟，待细胞开始脱落时，倒去消化液，加入新鲜培养液，悬浮和吹打分散细胞。也可以待细胞*消化脱落，500×g离心5分钟，去除消化液，用新鲜培养液悬浮细胞。1：3或1：5稀释细胞后，分瓶继续培养。
2）细胞株的冻存：
1． 取培养2～3天生长旺盛的细胞，用细胞培养液将细胞配成2×106～2×107/ml。
2． 在1ml细胞冻存管中加入0.5ml细胞悬液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亚砜（或甘油），混匀后密封。置4℃ 1小时，－20℃ 2小时，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。
3）细胞株的复苏：复苏时，从液氮中取出冻存管，立即置37℃水浴中融化细胞。将细胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培养液中，置37℃ 5％CO2饱和水汽二氧化碳培养箱中培养。悬浮细胞待细胞全部沉降后小心吸去上清液，更换新鲜的上述培养液，继续培养；帖壁细胞则培养2～3小时，待细胞帖壁后，倒去培养液，更换新鲜的上述培养液，继续培养。也可以在加入新鲜培养液以后，500×g离心5分钟，去上清液，加入新鲜培养液，继续培养。
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以Hyclone为例，主要供应的血清主要有：
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SH30084.03 500ML 澳洲源 适合娇贵细胞的培养
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SH30070.03 500ML 北美 适合娇贵及干细胞
SH30071.03 500ML 北美 优等级别
SH30370.03 500ML 北美 标准型
SH30406.02 500ML 新西兰 适合一般细胞，普通肿瘤细胞
SH30406.02M 500ML 新西兰 干细胞
SH30084.03M 500ML 澳洲源 干细胞
SH30406.02E 500ML 新西兰 胚胎干细胞
SH30084.03E 500ML 澳洲源 胚胎干细胞
SH30070.03E （带红色标签） 500ML 北美 干细胞
SH30068.03 500ML 美国 碳吸附血清
SH30068.03HI 500ML 美国 碳吸附，灭活
SH30118.03 500ML 北美 新生牛
SH30074.03 500ML 美国 马血清
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