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动物组织样本的前处理

上海将来实业股份有限公司

2016/2/19 9:56:06

一、匀浆介质的制备:

一般采用pH 7.40.01mol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA-2Na0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。

二、组织匀浆的制备

1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到25mg在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。

2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化钠溶液)或者0.86%的生理盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。

3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。

① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。

② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。

③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。

        镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。

4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.

、样本保存:

        动物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如*冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。

        制备好的匀浆液建议不要冻存,当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指标4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,总蛋白测定可存5~7天等)

 

产品:

巧克力琼脂平板(9cm)Chocolate Agar10个/包用于嗜血杆菌、奈瑟氏菌分离培养【英文名称】Chocolate Agar
【编号】HBPM006
【规格】10个/包
【包装用途】用于嗜血杆菌、奈瑟氏菌分离培养
双抗巧克力琼脂基础Bi-Anti Chocolate Agar Base250g/瓶用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养,每100ml 培养基中添加 1 支 22109 和5%~10%加脱纤维羊血(50701)【英文名称】Bi-Anti Chocolate Agar Base
【编号】12139
【规格】250g/瓶
【包装用途】用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养,每100ml 培养基中添加 1 支 22109 和5%~10%加脱纤维羊血(50701)
麦康凯肉汤(2015版药典)咨询.250g可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】22039
【规格】250g
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
草酸铵咨询.250g/瓶可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】50146
【规格】250g/瓶
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
3号胆盐咨询.100g/瓶可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】50120
【规格】100g/瓶
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
乙型肝炎病毒表面IgG抗体测定试剂盒咨询.96T孔内稀释【英文名称】咨询.
【编号】BS6283
【规格】96T
【包装用途】孔内稀释
志贺氏菌套装生化鉴定管14种(GB4789.5-2003)咨询.17支/套×10套包含葡萄糖半固体、化钾、K 化钾对照、鸟氨酸、赖氨酸、氨基酸对照、甘露醇、水杨苷、棉子糖、 甘油、七叶苷、5%乳糖、蛋白胨 水、葡萄糖铵、尿素琼脂、西蒙氏 柠檬酸盐、液体石蜡【英文名称】咨询.
【编号】20409
【规格】17支/套×10套
【包装用途】包含葡萄糖半固体、化钾、K 化钾对照、鸟氨酸、赖氨酸、氨基酸对照、甘露醇、水杨苷、棉子糖、 甘油、七叶苷、5%乳糖、蛋白胨 水、葡萄糖铵、尿素琼脂、西蒙氏 柠檬酸盐、液体石蜡
Preston选择性添加物Preston Broth Base Supplement1ml/支×5添加于HB8725中【英文名称】Preston Broth Base Supplement
【编号】HB8725-1
【规格】1ml/支×5
【包装用途】添加于HB8725中
E.coliO157显色培养基咨询.1000ml可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】M0306-1
【规格】1000ml
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
胰蛋白胨酵母浸粉铁琼脂ISP  Medium 6(Peptone Yeast Iron Agar)250g/瓶用于链霉菌属的培养【英文名称】ISP  Medium 6(Peptone Yeast Iron Agar)
【编号】12612
【规格】250g/瓶
【包装用途】用于链霉菌属的培养
胰蛋白胨V(进口)咨询.25kg可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】A1443
【规格】25kg
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
XLD琼脂培养基(平板)2012第2400150号咨询.90mm×20个/盒可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】CP0180
【规格】90mm×20个/盒
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
LB琼脂(不含糖)咨询.250g可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】28334
【规格】250g
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE)Trypticase Soy-Yeast Extract Broth250g用于单增李氏菌增菌培养(SN、GB标准)【英文名称】Trypticase Soy-Yeast Extract Broth
【编号】HBKP4150
【规格】250g
【包装用途】用于单增李氏菌增菌培养(SN、GB标准)
无机磷细菌培养基Norganic Phosphorus Bacteria250g用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解无机磷的效能【英文名称】Norganic Phosphorus Bacteria
【编号】HB8670
【规格】250g
【包装用途】用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解无机磷的效能
双岐杆菌生化鉴定管咨询.11种×10支可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】BS5198
【规格】11种×10支
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
EMJH培养基基础Leptospira  Medium Base EMJH250g/瓶用于钩端螺旋体的增菌培养,每90ml 培养基中添加 1 支 22601【英文名称】Leptospira  Medium Base EMJH
【编号】12610
【规格】250g/瓶
【包装用途】用于钩端螺旋体的增菌培养,每90ml 培养基中添加 1 支 22601
卵磷脂吐温80营养琼脂咨询.250ml×20瓶用于化妆品细菌总数测定(GB标准) 【英文名称】咨询.
【编号】BS2639
【规格】250ml×20瓶
【包装用途】用于化妆品细菌总数测定(GB标准) 
明胶培养基(营养明胶)咨询.100g可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】22250
【规格】100g
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
L-鼠李糖咨询.20支可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】GB112
【规格】20支
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
MMN琼脂Modified Melin-Norkrans Agar250g/瓶用于蜜环菌等外生菌根真菌的培 养【英文名称】Modified Melin-Norkrans Agar
【编号】11183
【规格】250g/瓶
【包装用途】用于蜜环菌等外生菌根真菌的培 养
乳糖-明胶生化管Lactose – Gelatin20支用于产气荚膜梭菌乳糖和明胶生化试验【英文名称】Lactose – Gelatin
【编号】GS079
【规格】20支
【包装用途】用于产气荚膜梭菌乳糖和明胶生化试验
牛脑心浸物(进口)咨询.25kg可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】A1502
【规格】25kg
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
沙氏(沙保弱氏)琼脂培养基咨询.250g可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】21090
【规格】250g
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
MRS肉汤(MRS)MRS Broth250g用于食品中乳酸菌测定【英文名称】MRS Broth
【编号】BS1137
【规格】250g
【包装用途】用于食品中乳酸菌测定
乳糖肉汤Lactose Broth250g用于食品中沙门氏菌检验前增菌【英文名称】Lactose Broth
【编号】HB4113
【规格】250g
【包装用途】用于食品中沙门氏菌检验前增菌
发根农杆菌培养基(YEB)Agrobacterium rhizogene Medium250g/瓶用于发根农杆菌的培养【英文名称】Agrobacterium rhizogene Medium
【编号】12173
【规格】250g/瓶
【包装用途】用于发根农杆菌的培养
绿脓杆菌生化鉴定盒咨询.5种×10次可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】71840
【规格】5种×10次
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)
改良Camp-BAP氏琼脂添加剂A咨询.1ml×5可参考产品说明书(索取产品说明书)【英文名称】咨询.
【编号】BS6037
【规格】1ml×5
【包装用途】可参考产品说明书(索取产品说明书)

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