加强生物安全柜正确使用规避感染风险

关键词：生物安全柜（Biosafty Cabinet，BSC）；规避；感染；风险

2003～2004年我国多起生物实验室感染事故的发生，使相关部门、广大科研工作者和实验室工作人员对生物危害有了较为深刻的认识。2004年，国家发布了*424号令《病原微生物实验室过滤条例》和国家标准《实验室生物安全通用要求》GB 19489-2004。2008年*与相关部门对“GB19489-2004《实验室生物安全通用要求》”重新修订为“GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》”，于2008年12月26日正式批准，并且于2009年7月1日实施。更加强调了生物安全柜作为一种生物实验室的主要安全设备，对保护实验室工作人员和防止疾病传播是*的，要求生物实验室操作人员必须具备规范化、标准化地使用生物安全柜的能力。这更有利于促进我国实验室生物安全管理水平的提高，防止给人员、环境等带来不可预计的危害。生物安全柜（Biosafty Cabinet，BSC）是二级生物安全实验室（BSL-2）*的设备之一，而HIV抗体筛查实验室应符合BSL-2要求【1］。因此对血站来说，配备并正确使用生物安全柜，减少实验室感染事件发生尤为重要。生物安全柜工作台大部分使用全不锈钢材料，是一种既能使操作区造成无尘，无菌的局部空气环境，保证试剂不受污染，又保证被研究的对象（如病毒、细菌等）不外溢，保护周围环境及操作员安全的隔离设备。目的是避免在实验操作过程中可能产生的感染性气溶胶或溅出物污染环境和人身安全。生物安全柜工作台通常是将预过滤器、过滤器、通风机、配电装置等组装在由金属板材制成的箱体内，成立独立操作单元。通风机运转后，形成一个向内的保护人的气流，同时操作区顶部经空气过滤的洁净空气，呈垂直层流式流经操作区，对产品提供可靠保护。排风也经空气过滤器，以保护环境不受污染。因此正确使用生物安全柜，可以有效地减少由于气溶胶暴露所造成实验室感染以及培养物交叉污染等，规避感染风险。

生物安全柜根据生物安全防护水平的差异可分为3级，

即Ⅰ级、Ⅱ级（A1、A2、B1、B2型）和Ⅲ级。

各级生物安全柜的区别见表1。

Ⅰ级生物安全柜保护工作人员和环境

Ⅱ级生物安全柜保护工作人员、环境和试样（样品），它可广泛应用于低、中等危险度（病原体1～3、DNA重组P1～P3）的临床细菌学、病毒学、微生物学、组织培养、生理学及其他生命科学的研究、加工、检验等部门，各型Ⅱ级生物安全柜的生物防护性能（人员、样本和环境）是相同的，但A1型安全柜不能用于挥发性有毒的化学物物质和挥发性的放射性物质的实验。A2型安全柜和B1型用于少量的挥发性有毒化学物物质和用于示踪剂研究的放射性物质的实验。B2型安全柜可以进行挥发性有毒化学物质和与微生物研究相关的放射性物质的实验。

Ⅲ级生物安全柜是为3～4级实验室生物安全等级而设计的，柜体*气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱（Glove box），能更加严格保护工作人员、环境和试样，主要适用于高风险的生物试验。

生物安全柜的排风系统中装有空气过滤器（High effi-ciency particulate air filter.HEPA），它能有效地截留所有已知传染因子，对于直径0.3μm的颗粒它可以截留99.97%，对大于或小于直径0.3μm的颗粒它可以截留99.99%，并确保从安全柜中排出的是不含微生物的空气。因此正确使用生物安全柜可以有效地减少由于气溶胶（Aerosols）暴露或溅出物所造成的实验室污染以及培养物等交叉污染，减少对环境和人身安全所造[工业电器网-cnelc]成的危害，有效地保护实验室人员的健康与安全，减少职业暴露的发生。

加强生物安全柜正确使用，规避感染风险是至关重要的。正确的安装和管理生物安全柜是保证工作台操作区洁净度的关键环节，严格规章制度，对使用的工具、材料和参观人员进行严格的控制。为严防外界各种高速扰动气流（如，来自门、窗、扇、风口、回风口等高速扰动气流，以及压缩空气）对操作区的干扰。因此生物安全柜安装位置应避开人流频繁处，不能安装在房间通风系统的进口，如果实验室有窗户，应始终保持关闭，以免气流直接吹到安全柜正面的操作口和排风滤器上。安全柜安装的周围（背面及侧面）和电源处要留出足够的空间，以便于及时清除赃物、维修和更换过滤器，减少对工作人员的污染机率。其次操作人员要经过专业培训，方可上岗，操作者必须穿戴紧口长纤维易灭菌的洁净工作服、帽、口罩，在进行Ⅰ级和Ⅱ级（A1、A2、B1、B2型）生物安全水平操作时，可穿着普通实验服。在进行Ⅲ级操作时，要穿着的个体防护衣（实验衣、隔离衣、连体衣、围裙）。手套应套在隔离衣的外面，必要时戴加有松紧带的套袖来保护操作员的手腕，有些操作需要戴眼睛（安全眼睛、护目镜）、面罩和防毒面具等，总之应按照不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备（personal protective equipment，PPE）及类型。操作过程中，台面不能存放过多物品，严禁堵塞前、后回风格栅，如属必需品，存放位置距回风口尺寸不得少于100 mm。操作时，操作者的双臂以直线方向缓慢伸入生物安全柜，并至少静止1min，使柜内气流相对稳定后再进行操作。操作者头部、身体严禁伸到操作区内，操作动作应控制在小程度。要分清污染物和洁净物品放置范围。实验过程中试验用的洁净的器材和物品应放置在操作者面对柜体内的左侧，像有生物危害性的被污染的或使用过的器材、物品和污物应置于右侧容器内。在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区、半污染区到污染区的方向进行，防止交叉污染。可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心机等）应靠近安全柜的后部放置，物品尽量靠后摆放，但不得挡住气道，以免干扰气流正常流动。实验完成后，对所有从安全柜取出的器材和物品均要进行严格的消毒处理。应至少让安全柜继续运转10～15 min来完成“净化”过程，亦即应留出一段时间将污染的空气排出安全柜，使台内净化。

大多数生物安全柜的设计允许持续24 h开机运行。并且研究人员还发现，生物安全柜连续工作有助于控制实验室中灰尘和颗粒的水平。若一天中有多个操作，期间不要中断运行，向房间中排风或通过套管接口与专门的排风管相连接的Ⅱ级A1型及A2型生物安全柜，在不使用时是可以关闭的。其他如Ⅱ级B1型和B2型等生物安全柜，是通过硬管安装的，就必须始终保持空气流动以维持房间空气的平衡。生物安全柜操作台不同于净化工作台，在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应禁止使用明火。使用明火后，产生的热量会对气流产生影响，干扰柜内气流稳定，并且在处理挥发性化学品和易燃物品时，也易造成危险，且明火可能损坏HEPA滤器。确实需要火焰时，如接种环灭菌，可用电炉、微型燃烧器等。生物安全柜维护应由有资质专业人员