技术文章

      16年初，各大媒体新闻报道，中国输欧茶叶大范围出现新型污染物，持久性的有毒物质高氯酸盐正在威胁中国的茶叶出口贸易，这个新的污染物如何进入茶叶的，目前还没有科学结论。
      欧盟正在酝酿一项针对来自中国茶叶的强制性标准，即规定茶叶中高氯酸盐的含量应在合理限值之下。
      高氯酸盐是一种持久性的有毒物质。由于人体的甲状腺会吸收高氯酸盐，并受其影响，减少对碘的吸收，进而扰乱新陈代谢，危害人的健康。欧洲食品安全局（EFSA）评估了长期和短期内暴露于高氯酸盐的风险，结果表明，单次摄入食品和水中的高氯酸盐对健康影响不大，但是长期摄入高氯酸盐，对人体的危害应当引起关注，尤其是孕妇、胚胎、婴儿zui容易受到危害。
      高氯酸盐污染的主要来源是航空航天、烟火制造、军火工业、橡胶制品、燃料涂料等。但高氯酸盐是如何通过上述源头进入茶叶的，目前还没有科学的结论。
      业内专家推测，茶树种植过程中使用的化学肥料、灌溉用水、工业废水或者自来水，食品加工过程中含氯消毒剂的使用以及包装材料的迁移，都可能成为茶叶高氯酸盐的污染来源。
      欧洲食品安全局（EFSA）生物危害与污染研究部食物污染专题负责人马可?比纳里亚曾表示，EFSA在评估报告中建议茶叶中高氯酸盐含量是0.55—0.58毫克/公斤，拟发布的0.75毫克/公斤的标准较为宽松。
      欧盟将在综合考虑各方科学意见后，公布正式适合欧盟全境的检测标准，预计强制性标准将于2016年正式颁布。
      未雨绸缪，建立茶叶中及其他可能的污染源中高灵敏度的高氯酸盐检测方法非常重要，上海安谱实验科技股份有限公司开发出茶叶中高氯酸盐检测--离子色谱法，可有效去除样品中共存的高浓度常见阴离子对高氯酸盐测定的干扰。方法前处理简单，能够得到较高的回收率和稳定性，并且灵敏度高，定量限能做到0.2毫克/公斤以下，*欧盟拟定标准。若选用离子色谱-质谱法或者LC-MS/MS法，可获得更高的检测灵敏度。
一．样品前处理
     准确称取2g粉碎好的茶叶样品，放入50mL 离心管中，加入10mL  乙腈，漩涡混合1min,超声震荡10min后，再漩涡混合1min,4000 r/min离心6min，上清液待净化。
SPE操作：
GCB小柱（SBEQ-CA1654）串联IC-RP小柱（SBEQ-IC0410-RP）：
活化：10mL  乙腈
以下开始收集：
上样：取2mL上清液过小柱
洗脱：2mL  乙腈
共得到4mL乙腈溶液，加入4mL  H2O,混合均匀后，取一定体积过0.22μm亲水PTFE滤器（SCAA-114），供仪器测定。
备注：出于对离子色谱的考虑，上机所使用溶剂为1:1的ACN：H2O；如果是液质检测，得到4mL乙腈溶液后，可以不必加水稀释
注意事项：水及未清洗干净的容器极易引入ClO4-本底，建议实验开始前，对所用试剂及耗材做下本底测试，并且尽量使用一次性的塑料耗材。
二．离子色谱法
仪器：万通 940 professional IC 
检测器：电导检测器  MSM 化学抑制器
色谱柱：Metrosep A Supp 5 – 250/4.0 
保护柱：Metrosep RP 2  Guard/3.5
淋洗液：5 mmol/L 碳酸钠 + 20% 乙腈（V/V）的水溶液
流速：0.7 mL/min
定量环: 250  μL
柱温：40 ℃
三．实验数据
3.1  标准曲线绘制
注意事项：CFGG-062009-01-01 高氯酸根离子标液，ClO4-(NaClO4)，1000mg/L溶于  H2O
标品中间液和工作液建议用乙腈稀释，会减少如果加标量体积过大，基质提取液不同造成的影响。

3.2 绿茶中高氯酸盐检测

图1  市售绿茶谱图

图2  市售绿茶加标0.5ppm谱图

图3 市售绿茶加标1  ppm谱图

3.3 普洱茶中高氯酸盐检测

图4  市售普洱茶谱图

图5 市售普洱茶加标0.5ppm谱图

图6  市售普洱茶加标1 ppm谱图

3.4 红茶中高氯酸盐检测

图7  市售红茶谱图

图8 市售红茶加标1  ppm谱图

3.5 回收率数据

四．实验中所需耗材