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2016/5/18 14:06:45J亚群禽白血病抗体抗体检测方法
亚群禽白血病是由, 亚群禽白血病病毒(J.\N/-.O , 04(0) 1*.:-+(+ 4(/.+,KH6A,)引起的一种主要导致肉用型鸡发生髓细胞瘤的传染病,该病自=>>= 年由307)* 在英国发现并报道以来[=],在世界范围内广泛流行,目前已遍布世界上所有的养鸡国家,其中在美国、英国等国家肉种鸡群中的感染率接近%$ ‘,给世界养禽业造成了巨大的经济损失。我国自=>>> 年从市场上商品代肉鸡中分离并检出了KH6A,,现已在山东、江苏、河南、宁夏、内蒙、吉林、黑龙江等省市分离到了多个KH6A, 病毒流行株[! ? #]。勿庸置疑,我国已经受到, 亚群禽白血病威胁,并造成了严重经济损失。
亚群禽白血病在鸡群中不仅可以水平传播还可垂直传播,导致感染鸡群的死亡率升高、产蛋量下降、发生免疫抑制、带来直接危害,另外免疫抑制还可严重影响禽流感等禽类烈性传染病的免疫预防效果,降低禽只对各种病原体的抵抗力,从而引发更为严重的危害。因此,自该病在国内不同地区出现和流行以来,就引起了兽医工作者和养禽生产者的高度重视。目前,现地生产中急需开展该病普查和净化的技术手段。虽然,国外用于检测,)0 : 2 囊膜蛋白$%&’ 的血清学诊断试剂盒已经商品化,但是因为$%&’ 存在着极为普遍的抗原变异,世界各地区,)0 : 2 分离株$%&’ 的分子变异规律不尽相同,不能确保来自国外的血清学试剂盒在中国境内使用的效果,zui不容忽视的问题是国外试剂盒价格昂贵,使用成本较高,不易在国内大范围推广使用。为了解决上述问题,本研究立足国内生产需求,开展国内分离毒株$%&’ 的表达和纯化研究,并以其为抗原,建立了用于检测,)0 : 2 的血清学()*+, 诊断方法。
本研究建立的()*+, 诊断方法,经交叉试验证实,具有良好的特异性,与其他禽类常见疫病的
阳性血清无交叉反应,特异性好;批内和批间重复试验证实,抗体水平不同的各种血清样品、在不同
时间进行检测的;< 值变异程度不大,重复性和稳定性较好。3"3 敏感性实验的结果表明,+./ 鸡攻毒后#- =即可检测到()*+, 抗体,直到实验进行到的第&’天仍然可检测到抗体。检测敏感性与国外试剂盒一致。
经对现地4 份血清样品测定结果表明,()*+, 诊断方法与国外商品化试剂盒在不同鸡群中的符合率zui低可达&7"4 9,zui高达到8’" ’ 9,符合率较好。3"’ 目前已有的研究结果及现地应用效果表明,本研究建立的间接()*+, 抗体检测方法,具有特异、敏感、适用、成本合理等特点和优势。随着技术手段的进一步完善、试剂盒组装技术的开发和利用,2 亚群禽白血病()*+, 诊断方法将为国内
各养鸡厂有效开展2 亚群禽白血病血清学调查提供有效的技术手段。同时,结合相应的病原学诊断方法,该方法也必将在也必将在2 亚群禽白血病的净化中发挥巨大的作用。
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