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洗板时应注意以下问题

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2016/6/15 9:31:18

洗板目的在于将特异性结合于固相上的抗原(抗体)与温育过程中吸附的非特异性成份分离使免疫复合物与待测抗体(抗原)呈一定比例洗板是否合格直接影响检测结果的准确性洗板应严格按照说明控制洗板时间及洗板次数ELISA 检测一般用洗涤液洗板3 洗涤液应严格按照操作说明进行稀释洗液应注满每个微孔并注意洗液不外溢垂直甩板避免交叉污染防止出现假阴性及假阳性结果使用洗板机洗板可一定程度上避免环境污染提高工作效率洗涤开始时注意观察每根吸液针是否一直插入孔底并吸干孔内全部液体严格按照要求设置一定的洗板时间及洗板次数洗板过程中注意冲力大小避免冲力过大导致酶结合物丢失吸光度值偏低洗液应根据不同厂家的酶标板调整注水量注意不要溢出孔外稀释洗液所用的蒸馏水或去离子水酸碱度适中使配出的洗液pH 7.2~7.6 范围内用非金属容器保存保持液体新鲜无污染沉淀洗板结束后将板拍干应垂直扣在备好的干净的吸水纸或毛巾上且注意每次更新干净的吸水纸或毛巾

洗板时还应注意以下问题

(1) 需每天校正注液量及残液量洗涤后残液量不得大于2μl

(2)及时更换破损吸液针避免破坏底板包被

(3)针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度避免冲洗针头卡住酶标板

(4)注意调整洗液量洗液量过多将溢出过少将达不到洗涤效果

(5)关机前使用蒸馏水冲洗管道避免洗液的结晶物堵塞管道

(6)不同种试剂盒的洗液严禁混合使用临床操作中工作人员由于担心洗板次数过少达不到去除非特异性物质的理想效果而增加洗板次数zui近研究发现随着洗板次数的增加样本检测的OD 值降低造成假阴性结果及灰区标本的漏检

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