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原代细胞冻存液的制备、使用与保存

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2023/9/18 18:12:21
  原代细胞冻存液的制备和使用对于细胞的保存和复苏具有重要意义。以下是制备和使用原代细胞冻存液的步骤:
 
  制备:
 
  准备所需试剂和器材,包括DMSO、FBS、培养基、离心管、移液管、细胞计数板、显微镜等。
 
  收集细胞样品,加入适量培养基进行洗涤。
 
  弃去培养基,加入适量DMSO和FBS混合液进行细胞冻存液的制备。
 
  将细胞冻存液分装到冻存管中,每个冻存管中加入1毫升细胞冻存液,标记好冻存管。
 
  将冻存管放入梯度冻存盒中,然后保存至-80℃过夜(如果没有冻存盒,可以先在4℃冰箱放置30 min,然后转移至-20℃放置1-2 h,最后转移至-80℃过夜),第二天取出放入液氮罐,并记录好位置信息。
 
  使用:
 
  准备所需器材和试剂,包括细胞冻存液、离心管、移液管、培养基等。
 
  从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37℃水浴锅中进行复苏。
 
  复苏后,将细胞转移至培养基中进行培养。
 
  保存:
 
  在复苏后数小时内将细胞传代并培养,以便快速扩增和存储。
 
  可以将细胞保存在常规培养箱中,但需要注意温度和湿度的控制。
 
  可以使用细胞冻存盒将细胞保存于-80℃冰箱中,以延长细胞的存活时间。

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