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Lncap(前列腺癌细胞)
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细胞名称 | 人前列腺癌细胞;LNCaP |
形态特性 上皮样;梭形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由Horoszewicz JS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长,所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞;该细胞贴壁不牢,达不到汇合状态,而且会使培养基迅速变酸;传代后48h内一定要保持培养瓶静止.如果此时挪动培养瓶,会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况,需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁,细胞贴壁后可更换培养基。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代;5~7天1次。
传代情况 P50
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色体 72~88,XY
使用权限 A类
人前列腺癌细胞;LNCaP参考图片:
人前列腺癌细胞;LNCaP
传代培养首先:
细胞复苏:
1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.
2.在无菌台内将*培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养瓶内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养,24h后换液;也可复苏当时离心(1000rpm 5min左右)后,*培养基重悬培养,适时换液。
细胞传代:
1.贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死细胞,50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后收集离心(1000rpm 5min左右),新鲜培养基重悬沉淀,加入*培养基后继续培养或实验.
2.悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度或需更换新培养基,可先离心(1000rpm,5min左右)后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养.
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