细胞介绍

华雅干细胞提供的人脐带间充质干细胞是P1代的冻存细胞，或者P1\P2代复苏细胞，可为用户量身定制。该细胞取自满月自然分娩的胎儿脐带，采用无血清人脐带间充质干细胞培养基纯化培养，冻存细胞每支含量为≥2.2×10⁶个，复苏细胞每T-25含量≥1.5×10⁶。该细胞无支原体、病毒、细菌等外源性微生物污染；内毒素指标符合行业标准；具有良好的增殖和分化能力，可以培养多代并维持未分化状态；可附带干细胞表面标记物流式鉴定报告及相应病原微生物检测报告。

货号

HUMSC-01；HUMSC-02A/B；HUMSC-03A/B

规格

按需定制

培养基

无血清培养基或常规培养体系

运输

干冰/特制运输体系

细胞特征

细胞镜下观察：细胞贴壁, 长成梭形，有些细胞排列呈鱼贯状相连，间有旋祸状排列。经过测试具备间充质干细胞的性能特征，具有良好的增殖和分化潜能，可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。

质量控制

严格的细菌、真菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体检测，可附第三方检测报告。

培养条件

37℃，5% CO₂，PH值7.2~7.4，无菌恒温培养。

用途

本产品仅供科研。

相关操作

细胞复苏

1.把HUMSC培养基放入37℃水浴中预热；

2.从液氮中取出HUMSC迅速放入37℃水浴快速解冻（解冻后不要继续孵育细胞）；

3.在超净台中加入5ml的HUMSC培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；

4.弃上清，加入5ml的HUMSC培养基重悬细胞，转移到T-25培养瓶；

5.将培养瓶置于37℃，5% CO₂的无菌恒温培养箱中培养；

6.第二天，用新鲜的HUMSC培养基给细胞换液。

传代培养

1.在显微镜下观察细胞，当细胞融合度至80%时，即可传代；

2.37℃水浴预热培养基；

3.在超净台中，弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞；

4.在显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，即可加入5ml培养基终止消化；

5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散；

6.将细胞转移到15ml离心管中，1200rpm离心4min；

7.弃上清，加入15-20ml的培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例传到 T-25细胞培养瓶中。确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间，细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶），混合细胞悬液，确保细胞均匀分布；

8.将细胞培养瓶置于37℃，5% CO2的无菌恒温培养箱中培养；

9.每两天用新鲜、预热的培养基进行换液。

细胞冻存

1.细胞消化和计数，用胰酶对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数。

2.1200rpm离心4分钟，去掉上清。

3.根据细胞计数的情况，加入适量的冻存液，使细胞密度在1×106/ml左右（或根据自己希望达到的细胞密度）。

4.轻轻地重悬细胞，将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖。

5.将冻存管放入程序降温冻存盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃。

6.第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。

提示：细胞培养方案及涉及到的所有试剂耗材，可统一匹配，具体详情，可在线咨询。

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