重庆市华雅干细胞技术有限公司在重庆地区*代理美国Peprotech公司旗下的(BioGems)的流式抗体

固定/ 破膜剂

（一）应用于流式细胞仪检测临床全血标本细胞内多项免疫学指标
肝素-钠抗凝的全血样本，室温存放，在24 小时内使用。
1. 取抗凝血50ul 放入流式管中。
2. 加入检测细胞表面分子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
3. 加入1ml 溶血素，振荡均匀，室温放置20 分钟，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
4. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
5. 加入300ul 固定/ 破膜剂，振荡均匀，室温放置20 分钟。离心（300g 5 分钟）去除上清液。
6. 加入胞内细胞因子检测用荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
7. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
8. 上机分析。

（二）应用于流式细胞仪检测外周血PBMC 的细胞内多项免疫学指标
1. 使用淋巴细胞分离液分离外周血样本，获得新鲜PBMC（外周血单个核细胞）后，取1X106的细胞放入流式管中。
2. 加入检测细胞表面分子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
3. 加入300ul 固定/ 破膜剂，振荡均匀，室温放置20 分钟。离心（300g 5 分钟）去除上清液。
4. 加入检测细胞内细胞因子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
5. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
6. 上机分析。

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