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鸡传染性法氏囊抗体elisa试剂盒测定步骤：

测定时一般需经过以下步骤：固相包被→加待测样品→温育→洗涤 加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂,操作不当将引起较大的误差。

操作注意事项以下5个方面。

1．随着其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理,例如对血清标本作适当稀释,或离心分离血脂等。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。

2．加样一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加样：加标本,加酶结合物,加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物,底物和终止液时则不需更换吸嘴。

3．在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不*,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。

4．洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分,游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。

5．准确判定结果须使用ELISA测读仪（酶标仪）,比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值（A值）。酶标仪具有良好的重复性。

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