起订量:
48T/96T 人Apelin ELISA Kit
免费会员
经销商武汉贝茵莱生物科技有限公司,是一家专注于生命科学和生物技术领域的高科技企业,企业经营进出口生物试剂、耗材等,所经营销售的范围也在日益的增长和扩大。在常规试剂和中间体的基础上也包括实验仪器、消耗品、普通器材,分子生化试剂、免疫试剂和细胞培养试剂等,在满足试验和生产的常规需求以外,逐渐过渡到应用于广大的研究机构和崭新课题.由单一的试剂供应过渡到可以根据客户需求,提供*的定制加工和全线的产品*,选择采购服务.。 我们相信,在不懈的努力下,一定会把贝茵莱建成集生产、研究开发和销售于一体的国内外的*企业。
ng gu武汉贝茵莱生物科技有限公司代理几千种 ELISA 试剂盒,数万种抗体,并代理*产品近万种,涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。为了节省您的时间,我们还可以提供代检测服务。
ELISA 试验时,注意事项如下:
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入
具体事项请。