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酶联免疫方法常见标本的处理方式:1、采集血浆时一般不加抗凝剂(主要为枸橼酸盐和柠檬酸盐),采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;2、采集血清时,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;3、胃液和唾液的采集方式一般现采现用,一般饭后半小时内不易采集(刚进食的唾液中富含丰富的唾液淀粉酶),的采集时间是空腹采集;4、尿液的采集方式基本和唾液一样的,即现采现用,但是一般隔夜尿不采集;5、组织提取液(肺泡灌洗液等),采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;6、粪便以及天然孔排泄物:采集后一般现用PBS/生理盐水溶解,充分混匀,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;7、贴壁细胞或半贴壁(分泌性蛋白),直接将细胞培养上清吸出,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理;8、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理;9、贴壁细胞或半贴壁(非分泌性蛋白),直接将细胞培养上清吸出,然后用0.01MPBS(pH7.4)将细胞吹下至10ml离心管,500-800rmpx10min,弃上清,沉淀转移至1.5ml离心管中,DDW重悬,置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理;10、不贴壁细胞(非分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,弃上清,沉淀移至另一10ml离心管中,0.01MPBS(pH7.4)重悬,500-800rmpx10min,弃上清,沉淀移至1.5ml离心管中,DDW重悬,置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理
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