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牛纤维蛋白原 CAS号9001-32-5 GR优级纯
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牛纤维蛋白原 CAS号9001-32-5 GR优级纯 1g/280元可凝固蛋白大于85(%),用于降纤酶效价测定.
产品介绍:
纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg),即凝血因子Ⅰ,来源于牛血浆。其分子量约340KD,由α、β、γ三对不同多肽链所组成,α-链分子量63.5 kDaβ-链分子量56 kDaγ链分子量47 kDa (约含4%碳水化合物)。多肽链间以二硫键相连。在凝血酶作用下,α链与β链分别释放出A肽与B肽,生成纤维蛋白单体。在此过程中,由于释放了酸性多肽,负电性降低,单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下,单体之间以共价键相连,则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块,完成凝血过程。纤维蛋白原溶液在50℃以上变性,因此加热温度不宜超过50℃;另外,纤维蛋白原一般应采用37℃的生理盐水溶解,溶解时温度不宜过低,在4℃条件下以及不含盐的溶液中较难溶解。
纤维蛋白原在降纤酶效价测定中的应用
降纤酶效价测定方法:按照降纤酶国家药品标准WS1-XG-031-2000进行。
1、纤维蛋白原溶液的制备 称取纤维蛋白原(批号F20130401,自制,可凝固蛋白含量为53.6%)75mg,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH7.4)10ml,置于37℃水浴中溶解。
2、标准品溶液的制备 取降纤酶标准品,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH7.4)溶解并分别稀释制成每1ml中含20单位、10单位、5.0单位和2.5单位的溶液。
3、测定 取试管(1cm*10cm)25支,置于37℃水浴中,分别加入纤维蛋白原溶液0.2ml,保温2分钟,再分别加入上述4种浓度的标准品溶液0.2ml,立即摇匀并计时,记录纤维蛋白的初凝时间,每种浓度的标准品溶液测定5次。以标准品溶液浓度的对数为横坐标,凝固时间平均值(秒)的对数为纵坐标,进行直线回归,计算相关系数。
4、实验结果 见表1和图1。
表1、降纤酶效价测定实验结果
浓度 (单位/ml) | 凝固时间(秒) | 平均凝固时间(秒) | RSD% | 浓度对数 | 时间对数 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
20.0 | 6.96 | 6.85 | 6.92 | 6.57 | 6.83 | 6.83 | 2.23 | 1.3010 | 0.8342 |
10.0 | 9.89 | 10.52 | 10.31 | 10.09 | 9.90 | 10.14 | 2.68 | 1.0000 | 1.0061 |
5.0 | 15.79 | 15.81 | 16.55 | 15.77 | 15.76 | 15.94 | 2.16 | 0.6990 | 1.2024 |
2.5 | 23.04 | 22.70 | 23.19 | 24.18 | 22.90 | 23.20 | 2.48 | 0.3979 | 1.3655 |
图1、降纤酶效价测定线性
5、分析 采用自制纤维蛋白原,按照降纤酶国家药品标准中的效价测定方法进行实验,结果显示自制纤维蛋白原符合实验要求,可以用来测定降纤酶的效价。