- 面议
起订量：
SeeDB实现生物体样本深层成像
随着富士胶片集团对生命科学领域的更大重视和投入，为了继续对中国客户提供更多前沿、品质可靠的产品，富士胶片和光纯药株式会社在中国设立了子公司富士胶片和光（广州）贸易有限公司，是一家试剂、耗材和仪器的综合供应商。除了富士胶片和光品牌产品，本公司还代理Enzo Life Sciences、VLVbio、imed、AdipoGen、Stemgent、Cosmo Bio、ReproCell、Funakoshi、Kikkoman、Sanplatec、SONSAN、Genovis、Albumedix、Indigo等国内外品牌，在学术研究、产业化、医疗等大范围领域作出贡献。
详细信息
SeeDB实现生物体样本深层成像
今井猛博士等人开发了一种对于水溶性生物体组织的形态和组成在不破坏荧光蛋白以及荧光神经同位素的条件下,可快捷简便地使大脑等生物体组织透明化的方法——SeeDB。SeeDB由水、果糖、还原剂构成。
SeeDB法是在使用共聚焦显微镜和双光子激发显微镜下可深层成像的方法。可利用荧光蛋白和神经示踪剂，实现对荧光神经回路的全貌阐明和定量分析等各种各样的应用。
◆SeeDB protocol案例
SeeDB法，可用于脊椎动物的各种组织，下面以小鼠大脑为例进行介绍。
１．固定
① 将小鼠大脑在4%多聚甲醛/PBS，4℃下固定过夜。
② 样本用PBS清洗三次（每次清洗10分钟）
２．透明化处理
③ 将样品加入放有20 mL的SeeDB:20 w/v%果糖溶液的50 mL锥形瓶中。
在室温下在旋转器中旋转4-8小时（约4 rpm）
在脆弱的样本和薄片情况也可以用压板式摇床（约17 rpm）
④ 将样本加入放有SeeDB:40 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中，室温下旋转4-8小时。
⑤ 将样本加入放有SeeDB:60 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中，室温下旋转4-8小时。
⑥ 将样本加入放有SeeDB:80 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中，室温下旋转12小时。
⑦ 将样本加入放有SeeDB:100 w/v%果糖溶液的50 mL锥形管中，室温下旋转12小时。
⑧ 将样本加入放有SeeDB的50 mL锥形管中，室温下旋转24小时。
长时间可延长至48小时。在透明化成功时，透光可观察到组织透明化。
３．观察
⑨ 将SeeDB处理过的大脑样本置于共聚焦显微镜或双光子激发显微镜下观察。
（注意点）
样本用SeeDB液固定。用SeeDB透明化处理后的样本折射率可达到1.49。因此，物镜中应该有甘油浸没透镜、油镜、透明化用镜片，即使浸水镜头到达2 mm深度也是没有问题的。浸没式镜片请使用浸没液，SeeDB不能用作浸没液。在使用干式镜头（折射率1.0）和浸水镜头（折射率1.33）获取画像情况下，需要补正深度值（补正值请参考相关文献）。
SeeDB 处理案例
SeeDB生物体样本透明化
左起依次为经SeeDB液透明化处理的小鼠幼胎（幼胎12天）
新生鼠（生后3天）的全脑、成鼠大脑（8周龄，厚度2 毫米）
SeeDB 观察案例
|
|
双光子激发显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠 （10周龄）大脑荧光成像 使用Olympus公司产品 多光子物镜：XLPLN10XSVMP观察案例 | 共聚焦显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠 （10周龄）大脑荧光成像 使用Olympus公司产品 有机硅浸没式物镜：UPLSAPO 10X2观察案例 |
双光子激发显微镜下的Thy1-YFP-H小鼠
（10周龄）大脑荧光成像
使用Olimpus公司产品
多光子物镜：XLSLPLN25XGMP观察案例
比例尺：100 微米
小鼠大脑固定后用Dil标记，SeeDB透明化处理案例
左：嗅球僧帽细胞树突（横向观察）
右：嗅球僧帽细胞树突（纵向观察）
使用Olympus公司产品
有机硅浸没型物镜：UPLSAPO 20X观察案例。比例尺：100 微米。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 291-79601 | SeeDB实验试剂盒 | 1 kit | 组织透明化 |
| 193-18391 | SeeDB:20w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 组织透明化 |
| 196-18401 | SeeDB:40w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 组织透明化 |
| 193-18411 | SeeDB:60w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 组织透明化 |
| 190-18421 | SeeDB:80w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 组织透明化 |
| 197-18431 | SeeDB:100w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 组织透明化 |
| 194-18441 | 深层透明化试剂 | 250 mL | 组织透明化 |
SeeDB实现生物体样本深层成像
