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细胞名称：HEEC 人正常食管上皮细胞|HEEC细胞有鉴定

一、细胞培养 

(一)原理 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来，广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，发展成一种重要生物技术，并取得显著成就。由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养。原代培养细胞离体时间短，性状与体内相似，适用于研究。一般说来，幼稚状态的组织和细胞，如：动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。 

 (二)操作 1．取材 用颈椎脱位法使乳兔迅速死亡。然后，把整个动物浸入盛有75％乙醇的烧杯中数秒钟消毒，取出后放在大平皿中携入超净台。用消过毒的剪刀剪开用碘酒和乙醇再次消毒后的皮肤，剖腹取出肝脏或肾脏。置于无菌平皿中。 2．切割 用灭菌的PBS液将取出的脏器清洗三次，然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎，直到成1mm3左右的小块，再用PBS清洗，洗到组织块发白为止。移入无菌离心管中，静置数分钟，使组织块自然沉淀到管底，弃去上清。 3．消化、接种培养 吸取0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液1ml，加入离心管中，与组织块混匀后，加上管口塞子，37℃水浴中消化8～10分钟，每隔几分钟摇动一下试管，使组织与消化液充分接触，静止，吸去上清，向离心管中加入5～10ml含5％小牛血清的MEM培养基，用吸管吹打混匀，移入二个培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。  

(三)结果 细胞接种后一般几小时内就能贴壁，并开始生长，如接种的细胞密度适宜，5天到一周即可形成单层。

HEEC 人正常食管上皮细胞|HEEC细胞有鉴定

2BS       人胚肺二倍体细胞

293（HEK-293；HEK293）人胚肾细胞  

293 Ad5人原胚肾转化细胞

2V6.11人胚肾细胞

BEAS-2B人正常肺上皮细胞           

Caco-2人结直肠腺癌细胞  

Caov-3人乳头状卵巢腺癌细胞

C918人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞      

CNLMG-B5537SKIN      人类成纤维细胞

CNLMG-B5538LC   人永生化淋巴细胞

CNLMG-B5538SKIN      人类成纤维细胞

CCC-ESF-1人胚皮肤成纤维细胞     

CCC-HB-2人胚膀胱组织来源细胞   

CCC-HBE-2人胚气管组织来源细胞

做细胞实验的同学看过来。原装ATCC细胞现货来啦。 

选择上海青旗生物细胞有3个理由：

1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验，效果更佳。

专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买，比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢，比如 BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。

细胞培养常见问题及解决方法

 ★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
 ★注：如运输过程中导致细胞污染或者死亡，我们将无条件补发
       收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
最后，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。