实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 放线菌孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

转化生长因子β受体1(TGFBR1)ELISA试剂盒3-氨基-2-恶唑烷酮 分析标准品土贝母苷甲 分析标准品，>95%巴卡丁 III（标准品）

转化生长因子β3(TGF-β3)ELISA试剂盒抗坏血酸钙 分析标准品 AR巴氯芬

转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒阿特拉津 分析标准品，99%大黄酚 97%巴氯芬(标准品)

转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒1-氨基-5-萘酚 97%大黄素 ≥90% (HPLC)巴洛沙星(标准品)

转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒4-雄烯-11β--3,17-二酮大黄酸 分析标准品，≥98%巴洛沙星

转谷氨酰酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒2,2-双[4-(4-氨基苯氧基)苯基]烷 98%大黄酸 98%酸倍氯米松

主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒3-溴肉桂酸 98%达旦黄 CP酸倍氯米松（标准品）

主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒1，4-二（基硅烷基）苯 96%甲基烯酸缩水甘油酯 98%苯佐卡因,对氨基苯甲酸

主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA试剂盒二甲基烯酸1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 稳定剂, 95%亚硫酸氢 AR苯佐卡因,对氨基苯甲酸(标准品)

主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒二烯酸1,3-丁二酯, 含500 ppm 对苯二酚（HQ）稳定剂, 98%乙 99%盐酸苯达莫司汀

轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒苯磺酸 98%乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)盐酸苯达莫司汀（标准品）

轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒正丁硫 standard for GC, ≥99% (GC)冰乙酸 AR,99.5%倍他米松

周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISA试剂盒N-丁基二乙 99%反式 GR,99.0%(剧品)倍他米松（标准品）

周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒双酚A三双甲基烯酸酯 试剂级正丁  >99.5%(GC)比阿培南

周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒1-苄基哌 97%正丁  ACS, ≥99.4%比阿培南（标准品）

周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒3-溴苯酚 分析标准品，用于环境分析乙酸丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)联苯苄唑
粉状毕赤酵母科研菌种约氏乳杆菌

种属: Lactobacillus johnsonii

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 饲料添加剂

培养基: MRS培养基：酷蛋白胨 10.0克 牛肉浸取物 10.0克 酵母提取液 5.0克 葡萄糖 5.0克 乙酸钠 5.0克 柠檬酸二胺 2.0克 吐温80 1.0克 磷酸氢二钾 2.0克 七水硫酸镁 0.2克 七水硫酸锰 0.05克 碳酸钙 20.0克 琼脂 20.0克 蒸馏水 1.0升 pH6.8

生长条件: 30℃

戴尔根霉

种属: Rhizopus│delemar

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 产延胡索酸

培养基: 0017

生长条件: 25-28℃
脱水存法：

①沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

低温存法：

①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。