产品名称：小鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒说明书

我司提供的ELISA试剂盒经济,实惠,可靠,完善,稳定的实验体系,优秀的科研队伍，准确可靠的实验结果是您可靠的合作伙伴，凡购买我司的试剂盒产品都可提供全程免费技术指导。     产品保存：2~8℃、有效期6个月。
本公司ELISA试剂盒均为进口抗体对国内包被，100%保证产品质量与客户实验结果，出现任何质量问题或是客户出不了实验结果均可免费退换的！
规格：96T
库存：现货。
保质期：6个月。
用途：生产、科研实验等领域科学研究。
运输：快递（根据客户要求，选择具体的运输方式）。
保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

规格：96T/48T

检测范围：0.937-60ng/mL

检测限：0.41ng/mL

重复性：板内变异系数＜10%

板间变异系数＜15%

小鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒

ELISA试剂盒使用说明书操作流程：
稀释——加样——温育——配液——洗涤——加酶——温育——洗涤——显色——终止——测定
1.有质量问题免费包换，合同上注明了的（质量问题包括运输不当，客户在使用过程中测不出结果，等等！）
2.全程技术指导.（包括售前的标本收集，使用过程中不明白的地方，实验结束后的数据分析，有任何疑问，我们技术都会即时给你去电）
3.提供免费代测的服务。（你只需把标本寄过来，我们为你节省时间，帮你出结果，原始数据，分析数据均可提供，一般时间是5天左右）
4.客户有任何问题，我们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是竭诚为客户服务！
为什么实验过程中孵育、洗涤需要振荡、如何振荡。
振荡孵育使反应更充分，振荡洗涤使背景更干净。建议使用酶标96孔微孔板振荡器。
孵育过程振荡，可以加快、加强抗原抗体分子间的相互碰撞接触，使得反应过程更加*，OD值通常会比未振荡孵育的结果要高；洗涤过程振荡，可以使洗板更干净，在很大程度上能降低背景值，同时可以提高试剂盒检测的灵敏度，具体操作请参见说明书。

注意事项：
1．酶标板袋拆封后，尽快将不用的板孔放回，并放入干燥剂，保持酶标板干燥。
2．用户在初次使用试剂盒时，应将试剂盒平衡至室温，各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
3，TMB A液避光保存。
4，洗板过程非常重要，不充分的洗板易导致假阳性。
5．建议所有标准品、样本都做双份检测。
6．请保持试验过程的连续性，禁止酶标板干燥，因干燥会使酶标板上的生物成分迅速失活。
7．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试管。
8．禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
试验所需自备物品:
1.酶标仪(450nm波长滤光片)
2.37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
3.自动洗板机
4.高精度移液器， EP管及一次性吸头： 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 5.吸水纸
洗板方法： 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的PBt或TBT洗涤缓冲液 至少 0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
样品收集:
1.血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA或肝素，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。
3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4.细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
5.其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测
6.样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。
7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。
结果判断:
1. 以标准品的浓度为横坐标， OD值为纵坐标， 绘制标准曲线。 如有设置复孔，则应取其平均值计算。 以标准品的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件，如curve expert 1.3或1.4，在软件界面既可根据样品OD值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 1478. 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。

9.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗体愈少，高的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素等ELISA测定多用此法。