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并由流动相携带样品进入高效液相色谱柱。色谱柱装有能获得分离效果的填料。这种填料称为固定相因为它被柱硬件包围住。检测器用来查看化合物流出色谱柱时被分开的谱带(大多数化合物没有颜色，所以人眼观察不到)。一个储液瓶装有溶剂(称为流动相流动相流出检测器可被送至废液瓶。因为溶剂是流动的)。一个高压泵(溶剂传输系统或称溶剂管理器)用来产生和计量流动相的流速。一般是毫升/分钟。一个进样器(样品管理器或自动进样器)可以将样品导入(注射)连续的流动相。
在显示屏上展现出来。定性和定量样品内溶物浓度(如图F)。由于样品中化合物性质差异很大，几种类型的检测器被开发出来。例如，如果一个化合物能吸收紫外光，可使用紫外吸收检测器。如果这个化合物发荧光，可使用荧光检测器。如果该化合物没有上述性质之一，可使用更广泛的检测器，如蒸发光散射检测器(ELSD)。强大的方式是顺序使用多个检测器。例如。再将电信号转换为色谱图高效液相色谱系统单元先记录电信号检测器连接计算机数据站紫外和/或蒸发光检测器可和质谱仪(MS)联用来分析色谱分离的组分。这样，从一次进样，可得到分析物的更多综合的信息。将质谱与高效液相色谱系统耦合称之为液质用.。
人员的培训与管理参与实验室管理的人员应对仪器足够了解，如有条件应参加厂商的高阶培训，熟练使用与维护仪器。凡申请使用仪器的人员应接受相关培训，对学过《仪器分析》课程的申用人可着重讲解使用中应注意的问题，对于未学过《仪器分析》课程的申用人可先在教学平台中学习相关课程，并接受强化培训后方可使用仪器，避免不熟悉仪器直接使用对仪器造成不可修复的破坏。
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