组织无机磷含量测试盒 离子系列
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上海酶科生物科技有限公司，位于上海市浦东新区外高桥保税区，由拥有一支由病理学专家、农学博士、主任技师等技术人才组成的科研团队，致力于检测试剂盒的自主研发、生产和销售以及来样检测等技术服务。
研发实力：是国内较早研制开发氧化及生化类科研试剂盒的企业之一，集研发、生产、销售、技术咨询、技术转让为一体，自主研究开发出一系列高技术高质量的产品，并提供相关的技术服务，立足国内，面向世界。力争打破国外大公司在生命科学领域对高技术试剂和试剂盒的接近垄断的地位，为中国在生命科学的这一领域占领一席之地。
产品概况：已经自主研发试剂盒800余种，包括生化、HPLC/GC和ELISA三大类。丙二醛（MDA）测试盒、羟脯氨酸（HPY）测试盒等产品有*的美誉度，且拥有自主知识产权。现有产品主要800多种，用途覆盖农、林、畜牧、水产、体育、生物、环保、营养等领域。
销售网络：酶科生物具备快速研发、生产能力，汇集了大量生物工程行业的高尖人才，与国内科研院校联合开发新产品试剂盒，建立了产、学、研相结合的科研攻关协作组和技术合作体，在生物技术行业拥有*的竞争力。
详细信息
组织无机磷含量测定试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。
测定原理：
钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入20mL蒸馏水，充分溶解后加入试剂二（全部），混匀。
标准品：液体×1 支，2μmol/L无机磷标准液，4℃保存。
无机磷提取：
按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入 1mL试剂一）进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定：
1. 分光光度计预热30min，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2. 打开水浴锅，调节温度到40℃。
3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，依次加入50μL标准液，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min 后于660nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 测定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660nm测定吸光度，记为A测定管。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
组织无机磷含量计算公式：
（1） 按照蛋白含量计算
无机磷含量(mmol/mg prot)= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷Cpr=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷Cpr
（2） 按照样本质量计算
无机磷含量(mmol/g)= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷W=1×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W
C 标准液：1mmol/L；V 总：上清液总体积，1mL=0.001L；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
W：样品质量，g。
注意事项：
1. 试剂三需临用前配制，并且当天使用完毕。
2. 40min内完成比色。
3. 低检出限为10μmol/L。
