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SILAC-细胞差异蛋白质组分析服务

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供货周期:现货 应用领域:医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业
上海创凌生物科技有限公司

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上海创凌生物科技有限公司位于上海杨浦科技园区,由生物领域专业人士创办,是一家集研发、销售、实验技术服务于一体的高科技企业。创凌坚持自己的经营理念,始终致力面向生命科学领域,从事生物医学技术服务的学术辅助/科研外包,科研机构及生产企业所需的各类生产原料、试剂、仪器、耗材等的业务。勤奋踏实地整合产品资源与技术资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案,帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。

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详细信息

SILAC-细胞差异蛋白质组分析服务简介

SILAC(Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)是基于哺乳动物细胞生长对“必需氨基酸”的依赖原理,将稳定同位素(13C、15N)标记的Lys(K)和Arg(R)加入细胞培养基中对细胞进行培养。在细胞的增殖过程中,稳定同位素标记的K和R自然“掺入”到蛋白质中,从而在细胞中所有的蛋白质上引入了质量标签(Mass Tag,3-10Da)。借助后续MS的高分辨率,在MS层面上,实现对蛋白质水平进行高精度定量的技术

SILAC技术基本的应用是做细胞/细胞亚组分(细胞质、细胞核、线粒体、外泌体等)的各种蛋白质表达差异谱分析此外,(1)使用SILAC技术标记小鼠、酵母、大肠杆菌、果蝇、线虫等模式生物,从而可以借助MS直接定量比较动物个体的蛋白质组差异(SILAM);(2)利用SILAC技术,借助细胞株,通用可以分析人体的不同组织的蛋白质表达谱差异(super-SILAC);(3)SILAC结合IP-MS(免疫沉淀-质谱)可定量分析蛋白质互作/翻译后修饰的定量分析(SILAC+IP-MS)。

SILAC技术的优势体现在(1)直接通过细胞代谢,实现对整个细胞蛋白质组的标记,从实验的源头引入质量标签(Mass tag),实验的系统误差显著降低;(2)实验步骤简单,只要将SILAC标记的和非标记的蛋白质1:1混合,就能进行后续MS分析;(3)定量准确度更高,定量信息丰富。

二、SILAC-细胞差异蛋白质组分析服务服务方案

(一)整体服务:

只需客户提供细胞即可,我方负责完成:

SILAC培养基制备。

细胞SILAC标记及标记效率MS检测;

SILAC标记细胞与非标记细胞扩增;

蛋白质提取、分离(SDS-PAGE)及染色;

切割条带,分别进行LC-MS测试;

MS数据分析,完成蛋白质的鉴定及定量分析,筛选差异表达蛋白;

差异表达蛋白常规生物信息学分析;

我方同样有技术实力进行具体蛋白质(经用SILAC实验筛选、验证后的蛋白)的功能实验。如有需求,方案另议。

(二)合作共赢方案:

原则是通过协商签订合同,双方各完成一部分实验内容。

客户方需从我方购买相应的SILAC培养基及耗材。我方提供细胞SILAC标记的实验方案,协助客户完成细胞的SILAC标记过程。

标记完成后,需用LC-MS鉴定细胞标记效率。该步骤需交由我方完成鉴定。

正式实验的蛋白质样品,需交由我方完成MS鉴定和定量分析。

三、其他特色:

SILAC培养基。我方能生产多种类型的SILAC培养基(K6R6、K4R6、K6R8、K8R10等),7-10个工作日发货,免去客户从国外进口SILAC培养基及其标记氨基酸的漫长货期。

SILAC培养基,500ml起订。

我方同时销售SILAC相关的试剂/耗材(dialyzed FBS,filter等),欢迎咨询。

四、客户发表的代表性论文:

Analytical chemistry 2017, 89(19):10248-10255. 

Analytical chemistry 2017, 89(21):11468-11475.

Journal of proteome research 2013, 12(5):2055-2066.

Amino acids 2014, 46(4):841-852.

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