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A005-96T 酶标板法 ABTS自由基清除能力测试试剂盒
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- A005-96T 酶标板法
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上海惠诚生物科技有限公司，成立于2010年，企业宗旨“惠质产品，挚诚服务”。惠诚生物自成立以来，一直致力于为客户提供一站式科学服务，产品覆盖设计开发全过程，提供实验室设计、实验室建设、仪器设备、耗材、试剂、技术服务等专项配套服务。上海惠诚生物按照客户的研发、生产和质量控制环节整合各种优质资源，优化资源组合，为客户提供整体解决方案。
上海惠诚生物在上海建立研发中心，在湖北和江苏有生产基地，在广州和深圳建立子公司，立足上海，销售网络遍布全国，为客户提供综合服务。
“不忘初心，砥砺前行”。 上海惠诚生物经过多年不懈努力，目前产品线包括：生命科学，分析化学，生化试剂和仪器耗材。客户遍布：生物医药，体外诊断，食品行业，石油化工，科研院校和研究所等领域。
特色产品：
生命科学：Crispr系列产品，组织因子，电泳预制胶，荧光染料，核酸探针，大包装新冠抗原抗体，工业用酶
分析化学：糖化学研究，脂类分析，植物分析，聚合物分析，医药分析，试剂盒
生化试剂：PEG衍生物，多肽，大包装胶体金辅料，大包装生物医药辅料，通用生化试剂
仪器耗材：生物上游工艺，生物下游工艺，细胞治疗，微生物监测，理化分析，公用系统。
品牌服务：
生命科学：
Abcam、AdooQ、ALPCO、Biolegend、Cytiva、Cayman、Dojindo、Immunostar、Invitrogen、Jackson、美天旎Miltenyi、Novoprotein近岸、Prozyme、R&D、SinoBiological义翘、Stratagene、SYSY、Thermo Fisher、Wako、Topoen
分析化学：
AOCS、Carotenature、CIL、DR、Elicityl、EP、Glycarbo、Larodan、Matreya、Megazyme、Nu-Chek、Olchemim、Phytolab、QCC、Reagecon、TLC、TRC、USP
生化试剂：
Aladdin阿拉丁、Avanti、Broadpharm、Focus、Laysan、LKT、Macklin麦克林、Sigma、TCI、Thermo Fisher、vivitide
仪器耗材：
湘仪、精骐、Corning、Eppordorf、浙江孚夏、力康、海尔、汇松、赫西、Mettler Toledo、Millipore、NEST、松下、Pall、Rainin瑞宁、Whatman、上海一恒
主要代理品牌以及产品
详细信息
ABTS自由基清除能力测试试剂盒
（A005-96T 酶标板法）
一、 测定原理
采用ABTS（2,2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt）评价样品抗氧化能力初由Miller等（1993）提出，现采用的一般是后来Re等（1999）改进后的方法。该方法利用ABTS可被过硫酸钾、过氧化氢、二氧化锰等一系列化合物氧化，生成蓝绿色的ABTS+阳离子自由基，在734nm处有大吸收峰。在抗氧化剂的作用下， ABTS+还原成无色的ABTS。通过测定734nm处的吸光值，即可判定反应物的抗氧化能力。
二、 试剂组成
试剂一：ABTS试剂300μL × 1支
试剂二：液体试剂300μL × 1支
试剂三：1mM Trolox标准溶液 1ml×1支（乙醇配制）
三、 储存条件及有效期
试剂盒-20℃可保存6个月。
四、 试剂的配制
ABTS应用液：将试剂二小心全部转入试剂一管内，旋好管盖，摇匀，室温放置12-16h，得到ABTS浓缩液。取10μLABTS浓缩液，采用稀释液（稀释液先采用纯水20×稀释）稀释至734nm处吸光度为0.65-0.75，记下稀释倍数（通常稀释倍数为50-200倍，可先从80-100倍区间内开始尝试。）将剩余浓缩液按稀释倍数稀释，得到ABTS应用液，避光存放。
Trolox标准溶液：如您需要将样品的ABTS自由基清除能力表示为Trolox当量（TEAC），则需要同步测定Trolox的ABTS清除能力；如您仅需要将结果表示为ABTS自由基清除率，则您可以忽略此步骤（可以不需要用到试剂三）。
五、 操作步骤
空白孔 | 测定孔 | 对照孔1 | |
ABTS应用液（μL） | 200 | 200 | |
样品溶液（μL） | 20 | 20 | |
稀释液（μL）2 | 20 | 200 |
充分混匀，室温避光静置30min3使之充分反应。734nm处采用酶标仪测定吸光值。
1如样品颜色较浅可不做对照管（即认为对照为0）；
2稀释液即您配制样品的溶剂，一般为水、乙醇、PBS等；
2建议反应30min，数值更为准确，但一般快速测定时，反应10min即可（参考文献：）。
六、计算公式
1. 简单计算清除率
2. 将清除率表示为Trolox当量（Trolox Equivalent Antioxidant Capacity, TEAC）
先根据计算方法1求出不同浓度Trolox的ABTS自由基清除能力，并作出标准曲线（如下图），再根据计算方法1求出样品的ABTS自由基清除能力，根据标准曲线求出TEAC。
注：1 如未做对照孔，可以将其视作为0；
2 质控孔求值时将其视作测定孔进行计算即可。
七、注意事项
1. 如样品中色素物质不是分析对象，建议先进行脱色处理，处理后样品可不做对照孔；
2. 如不确定样品的ABTS自由基清除能力，可先做不同浓度的稀释液进行摸索，并选择适宜浓度进行测定，高浓度下，浓度与清除率间并不线性相关。Trolox标准曲线绘制建议选取100-1000μM的浓度进行分析；
3. 混匀很重要，建议加样时反复吹打，加样结束后剧烈振摇酶标板30秒以上（液体不能溅出来）。
相关试剂盒:
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