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番红O固绿染色实验服务

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应用领域:医疗卫生,生物产业
上海研谨生物科技有限公司

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番红O固绿染色实验服务




番红0固绿染色服务介绍

番红0固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。中,起源于上世纪60年代的番红0 (safranin 0) -固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织结构而备受青睐。软骨呈红色,成骨呈绿色。


番红0固绿染色实验意义

番红0固绿染色染色是针对软骨及植物进行染色的方法,此方法简易,节约时间、用具器皿及药品,染色清晰。


实验步骤:

1软骨染色步骤:

①骨组织固定、脱钙,制成石蜡切片。

②切片常规脱蜡至水。

③入新鲜配制的weigert染液染色。

④流水冲洗。

⑤酸性乙醇分化液分化。

⑥蒸馏水洗。

⑦在固绿染色液内浸染。

⑧蒸馏水洗。

⑨入番红0染液内浸染。

(10)蒸馏水洗。

(11)用乙酸溶液洗涤切片,以便去除残留的固绿,再用蒸馏水洗。

(12)分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

(13)二甲苯透明,中性树脂封固。

(14)镜检。

2.植物染色步骤:

①标本的处理:固定,切成石蜡切片。

②粘片。

③脱蜡:二甲苯-50%二甲苯+50%乙醇- -100%乙醇- -95%乙醇- -85%乙醇- -70%乙醇- -50%乙醇- -30%乙醇- -水。

④入番红0染色液染色。

⑤酸性乙醇分化液分化15s。

⑥脱色: 35%乙醇- -50%乙醇- -70%乙醇- -80%乙醇。

⑦水洗1min。

⑧入固绿染色液内浸染,蒸馏水洗1min。

⑨无水乙醇脱水3-5min,无水乙醇脱水,50%二 甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。

(10)树脂封固。


染色结果:

(1)软骨染色结果:

软骨基质深红色:软骨细胞核蓝色;细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。

(2)植物染色结果:

木质化、木栓化的细胞壁染成红色;纤维素细胞壁染成绿色:导管染成红色,筛管染成绿色。

实验技巧5:

(1)软骨染色:

固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红o-固绿染色的分化很关键,分化过度容易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色

过深。

(2)植物染色:

番红染色后,在50%乙醇中脱色需经实践,如果脱色不够绿色会不好染;脱色过度会导致红色过淡,甚至全部绿色。


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