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10184ES70 动物组织直接PCR试剂盒
- 型号
- 10184ES70
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 动物组织直接 PCR 试剂盒
10184ES50
50T
433.00
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 动物组织直接 PCR 试剂盒
10184ES70
200T
1453.00
产品描述动物组织直接 PCR 试剂盒是一款可直接对不同动物组织进行 PCR 扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强、操作简易。
本试剂盒采用*的裂解缓冲液体系，可以快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组 DNA，如昆虫足翅、鼠尾、 鼠趾、动物皮肤和内脏等。裂解产物可以用于 DNA 提取纯化、也可以直接用于 PCR 反应、也可以在 -20℃ 或以下温度条件下长期保存备用。
本试剂盒中提供的 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)具有很强的扩增兼容性，不需要额外采用纯化提取试剂去除裂解产物中的各种残骸杂质，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为 2 倍浓缩 PCR 反应混合液，包含了用于 PCR 扩增除模板和引物外的所有组分，大大简化扩增步骤的操作过程，降低污染机率。
该试剂盒可用于动物基因扩增检测、转基因动物基因型鉴定等。
产品组分编号
组分
产品编号/规格
储存
10184ES50（50 T）
10184ES70（200 T）
10184-A
Lysis Buffer
10 mL
20 mL × 2
2-8℃
10184-B
Proteases
100 μL
400 μL
-20℃
10184-C
10184-D
2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)
5 × PCR Enhancer
500 μL
200 μL
1 mL×2
800 μL
-20℃
-20℃
a）Lysis Buffer 和 Proteases 两种组分配合使用于动物组织裂解。
b）2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 扩增所需要的热启动 Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等；已混有溴酚蓝染料作为电泳指示剂， PCR 产物可以直接进行电泳。
c）5 × PCR Enhancer ：高GC含量扩增（如大于65%）时，建议使用5 × PCR Enhancer。
运输方法冰袋运输，有效期1年。
保存方式1. 试剂 10184-A【Lysis Buffer】为动物组织裂解缓冲液，建议保存于2-8℃。
2. 试剂 10184-B【Proteases】为动物组织裂解剂，使用时请勿长久开盖，建议保存于-20℃，避免反复冻融。
3. 试剂 10184-C【2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)】，建议保存于-20℃，避免反复冻融。
4. 试剂 10184-D【5 × PCR Enhancer】，建议保存于-20℃，避免反复冻融。
操作方法
1. 在离心管中加入 200 μL Lysis Buffer和2 μL Proteases，轻轻涡旋混匀。
2. 取约 10 mg（长度2 mm左右）动物组织，置于上述离心管中，轻轻涡旋混匀。
3. 55℃孵育5-30 min，然后 95℃处理5 min。
4. 12000 rpm 离心2 min。
5. 将上清转移至新的离心管，-20℃保存或直接用于 PCR 扩增。
【注】：
a）Lysis Buffer 与 Proteases 混合后尽快使用，不宜长期保存；大量样本操作时，可以将 Lysis Buffer 与 Proteases 按 100 μL:1 μL 的比例混匀备用。
b）组织应取少量并尽量剪碎，以便裂解反应更顺利进行。各组织推荐使用量：鼠尾：长度2-4 mm；鼠趾：1-4个；鼠脏器、脑：直径2-4 mm；斑马鱼、线虫、果蝇等昆虫组织：1-4个；细胞数量:105-108个。斑马鱼、线虫、果蝇等较小样本的组织，可适当减少Lysis Buffer至50-100 μL。昆虫等外壳坚硬的样本，建议剪碎样本并增加Proteases至4 μL。
c）55℃孵育，一般 5 min 即可满足多数 PCR 需求，如鼠尾、鼠耳等组织；若需要的 DNA 量较大或样品较难裂解，可将时间延长至 30 min 或更久；裂解时间可在5-30 min之间调整，组织块不需*裂解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
PCR反应鉴定——PCR反应体系组分
体积（μL）
终浓度
2× Tissue Direct PCR Mix（With Dye）
10
1 ×
Forward Primer（10 μM）
0.5
0.25 μM
Reverse Primer（10 μM）
0.5
0.25 μM
裂解产物（DNA模板）
2
-
无菌超纯水
To 20
-
【注】：各组分使用前应充分混匀。
a）模板使用量：建议总体系的5-20%之间，避免超过总体系的20%。
b）引物终浓度：反应性能较差时，推荐在 0.1- 0.5 μM 范围内调整引物浓度。
c）反应体系：推荐使用 20 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
d）体系配制：配制好PCR反应体系，置于涡旋仪上涡旋混匀，瞬时离心将反应液集于管底。
e）对照反应：建议进行PCR时，设置阳性和阴性PCR对照反应以便于排除假阳性或假阴性的干扰。
PCR反应鉴定- PCR反应条件循环步骤
温度
时间
循环数
预变性
94℃
5 min
1
变性
94℃
10 sec
35
退火*
60℃
20 sec
延伸
72℃
20 sec
终延伸
72℃
5 min
1
*退火温度：请参考引物的理论 Tm 值，退火温度可设置低于引物理论值5℃，或通过梯度 PCR 确定最佳温度。
注意事项：1. 建议使用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响 PCR 效率。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。
3. 本产品仅作科研用途！常见问题与解决方法
常见问题
可能原因
解决方法
阳性对照、待测样本均无条带。
PCR反应体系或反应条件不合适。
使用梯度PCR摸索PCR最佳反应条件。
PCR试剂保存不当失去活性。
2× PCR Mix应保存于-20℃，使用时避免反复冻融。若使用频繁，可在4℃短时间存放。
引物设计问题。
尝试重新设计引物进行检查。
阳性对照有目的条带，待测样本无条带或条带弱。
不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。
使用新鲜的试剂。
加入组织裂解液过量。
增大反应体系，或减少裂解液的用量。
样本裂解混合液保存不当或保存时间过久，DNA基因组已经降解。
裂解混合液可在4℃保存2-3天，尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。
模板加入量不适合。
在反应体系5-20%范围内优化模板加入量。
PCR循环数不足。
适当增加PCR的循环数，推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂，一般PCR反应要比用纯化的 DNA模板多5-10个循环为佳。
非特异性扩增
PCR退火温度太低，循环数、引物浓度或模板浓度太高。
提高PCR退火温度，降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。
PCR引物错配。
重新设计PCR引物。
配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。
PCR反应体系的配制在低温下进行，配制完成后尽快进行PCR扩增反应。
阴性对照出现目的条带
操作工具或试剂污染。
实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。
样本间交叉污染。
每个取样器只对一个样本使用；或取完一个样本后，将取样器刃口浸入2%的次氯酸钠溶液中，反复涮洗，然后用干净的纸巾擦干残液。
相关产品产品名称
货号
规格
Agarose琼脂糖HOT
10208ES60/76
100/500 g
YeaRed 核酸染料（10,000× 水溶液）HOT
10202ES76
500 μL
2000 DNA Marker HOT
10501ES60/80
100/1000 T
5000 DNA Marker HOT
10504ES60/80
100 /10×100 T
100 bp DNA ladder
10507ES60/80
100 /10×100 T
1 kb DNA ladder HOT
10510ES60/80
100 /10×100 T
15000 DNA Marker
10512ES60/80
100 /10×100 T
HB210824
