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SNU-182 SNU-182 人肝癌细胞
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镜像绮点（上海）细胞技术有限公司（子公司赛百慷）( Cellverse（iCell） Bioscience Technology Co., Ltd. )是一家专注于研发生产高品质原代细胞、细胞系、干细胞以及相关生物学试剂，并提供专业生物医学技术服务外包的高新技术企业，公司总部位于上海。
镜像绮点专注于研发生产高品质的人体组织源及动物组织源的原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品，提供以及相关的CRO，CMO服务，同时也为客户提供相关培养体系，培养基等试剂。在中国，镜像绮点除与中国科学院细胞库合作外，还与各地医学学院、机构、药企合作，其中包括:上海交通大学医学院，复旦大学医学院。
目前，镜像绮点已经建立起先进完备的“人类组织源原代细胞库和细胞系库”两大细胞资源库，各种种属源细胞株(系)500多种，原代细胞包括人源、鼠源、兔源、猪源、羊源以及其它动物源近700多种，3000多株现货，引进了生命科学领域的全套实验设备，建立了先进的生产研发实验室，采用了先进的行业技术标准、制造工艺、质检流程，保证了产品出厂的品质，公司同时更注重产品售前与售后的技术服务，着重满足客户的需求与体验。还申请了相关细胞培养试剂等十几项zhuan利产品。正是凭借原有的原代细胞领域原创技术的优势，镜像绮点（上海）细胞技术有限公司，已经成为国内外众多生物医药企业诚信的合作伙伴和坚强的技术后盾。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司
上海市奉贤区茂园路260号临港南桥科技城56号楼7层
详细信息
SNU-182 人肝癌细胞描述
该细胞系来自 24 岁亚洲男性。细胞包含单个细胞核，Southernblot 可检测到乙型肝炎病毒(HBV)DNA，不表达乙肝病毒基因组 RNA，需在 2 级生物安全防护操作。
细胞特性
1） 来源：人 肝癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
细胞用途：仅供科研使用。
SNU-182 人肝癌细胞接收后的处理：
1） 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2） 在显微镜下确认细胞生长状态时，在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3） 观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4） 贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。
5） 悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基）。
6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。 收到细胞后di一次传代建议1：2传代 。
SNU-182 人肝癌细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1．准备1640（推荐iCell-0002）培养基,优质胎牛血清FBS 10%；GlutaMAX™-I（GIBCO,35050061) 2mM；Sodium Pyruvate(GIBCO 11360070), 1mM。P/S 1%
2. 培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
注：di一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3） 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例；
1，细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。
2，4min ，1000rpm 离心去掉上清。加基础培养基和血清重悬细胞，再加入DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为8%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和技术服务：
一、原代细胞服务
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源；
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源；
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等；
原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务；
二、细胞株/系服务
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书；
细胞系培养过程的技术指导；
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等；
三、iPS细胞
iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层在）；
iPS细胞增殖及冷冻保存；
iPS基础培养技术实习；
新药及实验仪器上市前评估；
四、技术外包服务：各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等
五、其他：根据客户需要定制服务等
