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X-射线晶体学
中级会员第5年
代理商安诺伦(北京)生物科技有限公司是一家创办于2015年的创新型高科技企业,公司由在国内科研试剂领域有着十几年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成,专门从事以抗体、蛋白、细胞、化学品为核心的试剂产品研发与销售。
自公司成立以来一直以“客户至上”为公司核心价值观,专注于为生命科学和生物技术领域的客户提供优质的产品和技术服务。本着始终拥有的服务热忱,安诺伦生物致力于成长为我国重要的生命科学试剂和成果转化一体化的前驱者、致力于成为中国大的科研试剂产品供应商之一。
Annoron——是安诺伦生物集科研试剂搜索、采购一体化网站平台,公司通过建立覆盖欧美的*,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
我们的优势:
1,覆盖欧美的*,总部设立在美国加州,采购团队有10多人,能进口涵盖抗体,蛋白,细胞,血清,耗材等的全门类生物产品。
2,货品多且全,目前,以我们美国公司为主体,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
3,现货库存,我们已经在北京和武汉建立了自营库存,并将逐步建立上海库存、成都库存、广州库存,目前涵盖100个门类,将近10000个现货产品!
4,期货提供加急服务,一般2-3周到货,超过时限加急费全免!
5,价格优势,依托我们一体化的整合优势,我们致力于提供竞争力的价格!
6,优质的信誉,我们的客户群包括*,清华大学,北京大学,复旦大学,南京大学等100多所大学;康龙化成,昭衍新药,美迪西,保诺生物,正大天晴等500多家公司!
我们的产品——
抗体类
• 一抗/二抗产品
• 标记一抗/二抗相关产品
• Elisa试剂盒,配对抗体
• 多种试剂盒,PCR试剂盒,DNA提取试剂盒,RT实时定量试剂盒
蛋白类
• 重组蛋白/天然构象蛋白
• 小分子抗原,细胞因子
• 多肽类
分子细胞类
• 肿瘤细胞/传代细胞/原代细胞
• 定制化的耐药细胞
• 高品质血清
• 常用培养基,分子细胞实验试剂
• 合成引物/载体/质粒
化学品与试剂
• 化学中间体
• 化学合成常用试剂
• 定制中间体合成
• 对照品/标准品
• 液相/气相色谱实验佐剂
欢迎您来电垂询,我们竭诚为您服务!
此致敬礼!
抗体: | 一抗,二抗,标记抗体,流式抗体,抗体血清 |
试剂盒: | Elisa试剂盒,PCR试剂盒,基因敲除试剂盒,Real-Time实时定量试剂盒,STR试剂盒 |
蛋白与多肽: | 重组蛋白,天然蛋白,多种肽段,多种属蛋白和抗原(动植物,细菌,病毒等) |
细胞产品: | 各种细胞株,种属多元化,细胞类型多样,肿瘤细胞,干细胞,星状细胞,传代细胞,原代细胞等 |
酶类: | 内切酶,蛋白酶,核酸酶,聚合酶 |
克隆/载体: | PCR克隆载体,细菌/病毒克隆载体,多种属的表达载体 |
血清/培养基: | 细胞实验常规培养基,澳洲胎牛血清,北美牛血清,高质量细胞实验相关试剂 |
常用试剂: | 对照品以及标准品,免疫组化常用试剂,免疫印迹常用试剂,常用显色试剂,细胞生物学试剂,气相色谱试剂,液相色谱试剂等 |
化学品: | 产品(提供结构或者CAS化学试剂,中间体,订制化学) |
引物/探针: | 依据序列三天支付结果 |
脂质体: | 常规产品常年现货 |
技术介绍:
X-射线分辨单克隆抗体-抗原复合物是分析单克隆抗体识别表位的可靠方法,该方法基于对单克隆抗体-抗原共晶体衍射的X-射线束的强度和角度测量,再用生物信息学的方法确定原子坐标,将复合体的三维结构完整可视化。
抗原表位分析对抗体人源化改造,抗体亲和力提高,抗体稳定性改造,发现新的功能表位,改变抗体特异性,设计新抗体,基于抗原-抗体相互作用的立体构型设计新型功能分子改造抗体都很重要。
应用该方法首先需获得纯度较高的抗原、抗体,并使其相互作用形成共晶,但由于成本及技术要求较高,难以建立结晶条件,某些细菌或病毒蛋白产量过低等原因,此方法并未广泛使用。
艾柏森同时有完备的蛋白质表达系统,如有需要请在网站内点击了解。
生物物理技术在表位作图中的应用:
X-射线衍射、冷冻电镜(cryo-EM)、核磁共振(NMR)、质谱(MS)和表面等离子体共振(SPR)等生物物理技术在利用单抗的B细胞表位作图研究中均发挥了重要作用。利用这些技术,不仅可以鉴定到构象性B 细胞表位,也可以鉴定线性B细胞表位。抗原-单抗复合物的 X-射线晶体学分析是目前准确的B细胞表位鉴定方法。
它可以精确地确定抗原分子中与单抗发生相互作用的氨基酸残基,甚至可以定位抗原上被单抗识别并结合的氨基酸残基的主链或侧链原子。不论被单抗识别的是构象性B细胞表位,还是线性B细胞表位,都可以通过抗原-单抗复合物的X-射线晶体学分析得到解析。
由于抗原-单抗复合物的 X-射线晶体学分析涉及抗原和单抗的纯化、抗原-单抗复合物的形成与纯化以及复合物的晶体学解析等,需要专业技术和大量资金支持;这对于一些可溶性的简单抗原来说就常常是一项难以完成的任务,而对于许多复杂抗原(如膜蛋白)而言则更加困难。因此,虽然目前已经鉴定到成千上万的单克隆抗体,但只有少数 B 细胞表位通过抗原-抗体复合物的X-射线晶体学分析方法得到解析。
由于需要对样品进行衍生和干燥,电子显微镜不适于研究抗原-单抗间的相互作用。但自2013 年冷冻电镜技术的建立使电镜技术研究抗原-单抗复合物的结构成为可能。由于冷冻电镜技术仅需要少量抗原-单抗复合物,不需要高纯度蛋白,也不用对复合物进行结晶,可以用于分析其它方法(如X-射线晶体学技术)无法解析的大分子复合物的结构,因此,冷冻电镜技术在表位作图方面比 X-射线晶体学技术更具优势。
目前,冷冻电镜技术常与X-射线晶体学技术相结合应用于B细胞表位作图研究。单独或与X-射线晶体学技术相结合,冷冻电镜技术已经用于 HIV、HPV 等病毒结构蛋白的B细胞表位作图研究。第三种应用于利用单抗的B细胞表位作图研究的生物物理技术是核磁共振技术。
核磁共振技术的分辨率恰好适合在原子水平解析抗原-抗体复合物中相互作用界面的结构信息,即 B细胞表位鉴定。该方法通过分析抗原本身与抗原-单抗复合物核磁共振信号的差异,可以快速、准确地确定抗原的B细胞表位氨基酸基序。基于核磁共振技术的B 细胞表位作图可以提供比突变体肽库或肽库筛选技术更详细的表位信息,同时又比X-射线晶体学技术更加快速。但是,利用核磁共振技术解析抗原的B细胞表位需要首先确定抗原中每个氨基酸残基的核磁共振信号,这对于大分子抗原来说是一个很大的挑战。
核磁共振技术单独或者与其他方法相结合已成功用于多种病原微生物结构蛋白的 B细胞表位作图研究。质谱也以其快速的优点而广泛用于B细胞表位的鉴定。在该方法中,首先在抗体存在或不存在条件下,以蛋白酶酶解抗原蛋白,然后利用质谱分析经分离纯化的酶切产物,从而确定被抗体保护的抗原蛋白的边界(表位区域) 。
这种B细胞表位作图方法的不足之处在于其只能鉴定到30−60个氨基酸残基的表位片段,不能进行表位的精确定位。虽然氕/氘交换-质谱技术提高了其表位作图的精确度,但仍低于基于X-射线晶体学技术和冷冻电镜技术的表位作图方法的精确度。经过 25 年的发展,随着样品处理技术的提高和*质谱仪的问世,基于质谱技术的 B 细胞表位作图所需的样品量更低,可以在不降低准确性的前提下分析更加复杂的抗原样品。
基于质谱技术的 B 细胞表位作图方法不再仅限于利用单克隆抗体的表位鉴定,已经扩展到利用多克隆抗体的 B 细胞表位作图。表面等离子共振技术近年来迅速发展并应用到生物分子相互作用的研究领域。该技术不仅具有无需标记、特异性强、灵敏度高、样品用量小的优点,而且可实现在线连续实时检测。
基于表面等离子共振技术的 B 细胞表位作图类似于ELISA技术,虽然其B细胞表位作图的分辨率低于基于 X-射线晶体学技术和冷冻电镜技术的表位作图方法的分辨率,但其可以快速、高通量地进行系列抗原突变体或片段与单抗的结合能力的分析。表面等离子共振技术单独或与噬菌体展示技术等其它B细胞表位作图技术结合已经用于多种抗原分子的 B 细胞表位作图研究。
综上所述,基于生物物理技术的利用单抗的B细胞表位作图虽然都可以进行B细胞表位鉴定,但这些方法都需要昂贵的仪器,有的还需要抗原-抗体复合物的晶体结构信息或者需要专业技术人员的辅助才能完成。因此,X-射线晶体学技术、冷冻电镜技术和核磁共振技术更多地用于重要病原的中和性单抗识别的B细胞表位鉴定,它们都是B细胞表位作图方法的重要组成部分。
公司优势:
目前有几种方法用于抗原表位的分析:X-射线晶体学、噬菌体呈递展示随机肽库、LC-MS分析、3D-EM分析等;其中X-射线晶体衍射的方法是精确的方法,通过抗原-抗体共结晶的方法可以精确到原子级别。
艾柏森生物可以提供IgG、Fab、scFv、F(ab,)2、nanobody、串联scFV等抗体形式的表位作图。
如果您苦于无法得到优质蛋白,艾柏森同时有相关蛋白质表达业务,随时为您提供全面优质的服务。