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酵母蛋白表达系统
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代理商安诺伦(北京)生物科技有限公司是一家创办于2015年的创新型高科技企业,公司由在国内科研试剂领域有着十几年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成,专门从事以抗体、蛋白、细胞、化学品为核心的试剂产品研发与销售。
自公司成立以来一直以“客户至上”为公司核心价值观,专注于为生命科学和生物技术领域的客户提供优质的产品和技术服务。本着始终拥有的服务热忱,安诺伦生物致力于成长为我国重要的生命科学试剂和成果转化一体化的前驱者、致力于成为中国大的科研试剂产品供应商之一。
Annoron——是安诺伦生物集科研试剂搜索、采购一体化网站平台,公司通过建立覆盖欧美的*,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
我们的优势:
1,覆盖欧美的*,总部设立在美国加州,采购团队有10多人,能进口涵盖抗体,蛋白,细胞,血清,耗材等的全门类生物产品。
2,货品多且全,目前,以我们美国公司为主体,与欧美100多个品牌建立了正式的代理与合作,基本涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,优势更大!
3,现货库存,我们已经在北京和武汉建立了自营库存,并将逐步建立上海库存、成都库存、广州库存,目前涵盖100个门类,将近10000个现货产品!
4,期货提供加急服务,一般2-3周到货,超过时限加急费全免!
5,价格优势,依托我们一体化的整合优势,我们致力于提供竞争力的价格!
6,优质的信誉,我们的客户群包括*,清华大学,北京大学,复旦大学,南京大学等100多所大学;康龙化成,昭衍新药,美迪西,保诺生物,正大天晴等500多家公司!
我们的产品——
抗体类
• 一抗/二抗产品
• 标记一抗/二抗相关产品
• Elisa试剂盒,配对抗体
• 多种试剂盒,PCR试剂盒,DNA提取试剂盒,RT实时定量试剂盒
蛋白类
• 重组蛋白/天然构象蛋白
• 小分子抗原,细胞因子
• 多肽类
分子细胞类
• 肿瘤细胞/传代细胞/原代细胞
• 定制化的耐药细胞
• 高品质血清
• 常用培养基,分子细胞实验试剂
• 合成引物/载体/质粒
化学品与试剂
• 化学中间体
• 化学合成常用试剂
• 定制中间体合成
• 对照品/标准品
• 液相/气相色谱实验佐剂
欢迎您来电垂询,我们竭诚为您服务!
此致敬礼!
抗体: | 一抗,二抗,标记抗体,流式抗体,抗体血清 |
试剂盒: | Elisa试剂盒,PCR试剂盒,基因敲除试剂盒,Real-Time实时定量试剂盒,STR试剂盒 |
蛋白与多肽: | 重组蛋白,天然蛋白,多种肽段,多种属蛋白和抗原(动植物,细菌,病毒等) |
细胞产品: | 各种细胞株,种属多元化,细胞类型多样,肿瘤细胞,干细胞,星状细胞,传代细胞,原代细胞等 |
酶类: | 内切酶,蛋白酶,核酸酶,聚合酶 |
克隆/载体: | PCR克隆载体,细菌/病毒克隆载体,多种属的表达载体 |
血清/培养基: | 细胞实验常规培养基,澳洲胎牛血清,北美牛血清,高质量细胞实验相关试剂 |
常用试剂: | 对照品以及标准品,免疫组化常用试剂,免疫印迹常用试剂,常用显色试剂,细胞生物学试剂,气相色谱试剂,液相色谱试剂等 |
化学品: | 产品(提供结构或者CAS化学试剂,中间体,订制化学) |
引物/探针: | 依据序列三天支付结果 |
脂质体: | 常规产品常年现货 |
酵母蛋白表达系统介绍
毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是近年来发展迅速、应用广泛的一种真核表达系统。它是甲醇营养型酵母菌,有两个乙醇氧化酶(Alcohol oxidase, AOX)编码基因AOX1和AOX2,两种序列相似,AOX1基因严格受甲醇诱导和调控。当甲醇为碳源时,AOX1启动子可被甲醇诱导,启动乙醇氧化酶的表达,从而用甲醇进行代谢,含AOX1启动子的质粒可用来促进编码外源蛋白的目的基因的表达。
表达菌株特点
GS115:AOX1和AOX2基因都正常表达AOX蛋白(乙醇氧化酶),甲醇的利用率高,接近于野生型,属于甲醇快速利用型(Mut+)
KM71:AOX1基因被大部分剔除,只能利用AOX2为AOX编码,甲醇的利用速率变慢,表现为甲醇慢利用型(Muts)
外源基因的整合方式不同会导致表达菌株的表型不同:
菌株表型
酵母蛋白表达系统常用表达载体及筛选标记
载体信息
信号肽
对于胞外表达的蛋白除了可以用载体自带的信号肽,还有以下信号肽可供选择:
信号肽序列
毕赤酵母表达系统的优势
1. 含有*的强有力的AOX(醇氧化酶基因)启动子,用甲醇可严格地调控外源基因的表达。
2. 培养成本低,产物易分离,毕赤酵母所用发酵培养基成本合理,一般碳源为甘油或葡萄糖及甲醇,其余为无机盐,培养基中不含蛋白,有利于下游产品分离纯化。
3. 外源蛋白基因遗传稳定,外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中,不易丢失并能得到高表达菌株。
4. 作为真核表达系统,毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能。
艾柏森生物酵母表达系统的优势
1. 具备完备的毕赤酵母表达平台,可以根据蛋白特性或客户的需求设计不同的实验方案;
2. 具有高通量的筛选平台,可以快速有效的得到好的表达条件;
3. 具有大规模发酵生产能力
服务组合
经典案例
表达载体pPIC3.5K(胞内表达),目的蛋白32.49KD(理论值)
表达菌株:GS115/KM71
诱导条件:甲醇浓度0.5%/1%,诱导时间24h/48/72h
结果分析:从SDS-PAGE胶图中可以看到,目的蛋白(糖基化后40KDa左右)有明显表达,其中GS115-5#-24h,0.5%甲醇,GS115-2#-48h,1%甲醇,GS115-3#-48h,01%甲醇,KM71-1#-72h,1%甲醇,都有很明显的目的条带,目的蛋白成功表达。