- 面议
起订量：
09-250 溴化氢琼脂糖凝胶
- 型号
- 09-250
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大连精检生物科技有限公司成立于2019年，现已成长为一个拥有十几位科技研发员工为主体的生物科技企业，产品足迹遍及东北、华南等中国各地。精检生物科致力于研发、制造并销售食品安全和动物安全产品，产品种类繁多，能满足不同客户的需求。
大连精检生物食品安全研发中心位于中国辽宁沈阳，主要负责真菌毒素的快速诊断试剂盒、免疫亲和柱、胶体金检测卡的研发与生产。食品安全部的销售部门位于辽宁大连，销售的产品包括：真菌毒素免疫亲和柱、检测试剂盒与胶体金检测卡以及检测食源性细菌、天然毒素、食品过敏原、转基因、药物残留、植物病毒以及环境卫生隐患相关产品。
与世界各地生物科技公司一样，都是以坚定的态度去服务和解决客户所期望的质量标准要求。目前主要的客户包括大家熟知的国内食品生产企业，他们正在使用BIOSCO系统来快速确认和提前预警真菌毒素对产品的污染，从而有效地提高产品质量。此外，还拥有10多年制备单克隆抗体、小分子抗原化学合成的成功经验，为东北地区多家高校、科研院所提供单抗的制备解决方案，目前已成功制备60多种单克隆抗体。
对客户的产品造成威胁的物质有很多，包括已确定的或正在浮现的，比如危险的细菌、天然毒素、兽药残留、未知的食品过敏原、啮齿动物污物、卫生问题、断裂的兽用针头或其它污染物。百奥思科深谙一旦客户的产品被以上任何一种所污染，客户将面临严重的后果。百奥思科擅长于帮助客户在食品和动物安全这一广阔而多变的领域中找出安全隐患。
精检生物销售代表可以用“一站式服务”的方法帮助客户处理各种各样的问题，在当前越来越趋向于单源供应商的商业气候下，这种方法是一个巨大的优势。我们现在可以给客户提供多种诊断测试产品以及广泛的辅助产品和服务。
我们相信：要使客户的信任延续，便要将创新和持续不断的质量承诺结合起来。通过了ISO9001质量管理体系认证，这向公司的客户传达了一个信息：即精检生物科理解客户所期望的质量标准，且坚定不移地要达成这些质量标准。
详细信息
为确保产品的性能和无忧的操作，使用前请仔细阅读本手册，有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或当地的销售人员（联系方式见附录）。
1.产品介绍
CNBr Focurose 4FF是经过溴化氰活化后含有氰酸酯基团的快流速纯化介质，适用于偶联蛋白质、多肽、核酸等含有氨基的生物分子。在生物医药纯化工艺中经过反复的验证，得到了广泛的应用。
特点如下：
a.应用广泛，可适用于偶联含氨基的生物类大分子。
b.多点偶联，简单、灵活、快速、有效，能高效的维持生物分子的生物学活性及稳定性。
c.流速快、产率高、易于放大。
表1：介质性能参数
基质 | 高度交联4%的琼脂糖 |
粒径范围 | 45-165µm |
平均粒径 | 90µm |
结合载量 | 30mg(Trypsinogen)/ml(介质) |
pH稳定性 | 3-11（长期） 2-11（短期） |
最大流速 | 700cm/h |
操作压力 | ≤0.3MPa |
贮存溶液 | 100%丙酮 |
贮存温度 | 4-8℃ |
2.偶联条件
a.（A液）清洗
取适量的沉降胶（0.83g清洗完成后约为1.0ml），用5倍体积的A液将介质重悬，5min后将溶液抽干。重复此步骤5次。
备注：此步骤用于激活介质，要保证A液的清洗体积要充足、清洗时间固定在0.5h左右（时间太久介质上面的基团会水解）。
b.配基溶液的制备
将要偶联的生物分子用B液溶解或者将生物分子置换到B液中（生物分子浓度为1-10mg/ml,建议为5mg/ml）。
备注：确保偶联时的pH和盐浓度与B液一致。
c.偶联
将清洗完的介质和准备好的样品按等比例（体积比）混合，室温条件下温和混匀3-4h。确定偶联成功（通过测定偶联前后生物分子含量确定偶联效率）后，将溶液抽干。
备注：偶联建议在室温条件下偶联3-4h。对于不稳定的配基，建议4-8℃偶联过夜。
d.（C液）清洗
用5倍体积的C液将偶联后的介质重悬，再将溶液抽干。再重复此步骤3次。
备注：此步骤用于清洗介质中残留的生物分子，清洗要*。
e.封闭
用5倍体积的C液进行重悬，室温条件下温和混匀3-4小时后，将溶液抽干。
备注：此步骤用于封闭介质上面的基团，室温条件下温和混匀3-4小时即可。
f.（D液和E液）清洗
用5倍体积的D液将封闭后的介质重悬，5min后将溶液抽干；再用5倍体积的E液将介质重悬，5min后将溶液抽干。重复此步骤3次。
备注：此步骤用于酸碱清洗掉偶联不够紧密的生物分子。
g.保存
用5倍体积的纯化水将介质重悬后抽干，再用5倍体积的20%乙醇将介质重悬后抽干，最后用20%乙醇浸泡保存。
备注：此步骤用于保存介质，避免微生物生长。
h.溶液配制
A液：0.001MHCl、0.5M NaCl，调节pH 3.0，4-8℃保存（A液使用前要进行预冷处理）。
B液：0.2M NaHCO3、0.5 M NaCl，调节pH 8.3（如果要偶联的生物分子为IgG时，pH=8.5-9.0），室温保存。
C液：0.1M Tris-HCl，调节pH 8.3，室温保存。
D液：0.05M Tris-HCl、0.5M NaCl，调节pH 8.5，室温保存。
E液：O.05M 甘氨酸、0.5MNaCl，调节pH 3.5，室温保存。
F液：1.0M NaCl，室温保存。
3.清洗
清洗后可以去除一些强结合性物质（例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等），从而达到恢复介质的优良性能（例如载量、流动性、柱效等）。
建议每使用5次后进行一次清洗，具体清洗频率需根据纯化的初始样品的洁净度进行调整。
⑴常规清洗
a.用5-10倍柱体积的纯化水冲洗。
b.用5-10倍柱体积的D液冲洗。
c.用5-10倍柱体积的E液冲洗。
d.用5-10倍柱体积的F液冲洗。
e.用5-10倍柱体积的纯化水冲洗。
f.用5-10倍柱体积的20%乙醇冲洗后保存。
⑵剧烈清洗
a.用2-5倍柱体积0.2%非离子型去污剂冲洗后，立即用5-10倍柱体积纯化水冲洗。
b.用2-5倍柱体积6M盐酸胍冲洗后，立即用5-10倍柱体积纯化水冲洗。
c.用5-10倍柱体积的20%乙醇冲洗后保存。
备注：剧烈清洗条件是否适用主要取决于偶联的生物分子的稳定性，采用此条件清洗前，建议先做一个小规模的预实验验证生物分子的稳定性。
4.应用案例
案例一
案例二
5.常见问题
表2：常见问题及解决方案
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
偶联效率较低 | 1.B液盐浓度或pH不对 | 检测B液配制是否正确 |
2.偶联时间不够 | 延长偶联时间 | |
3.预活化填料不合适 | 尝试其它种类的预活化填料 | |
纯化时目标物不与介质结合 或结合量较低 | 1.上样量过载 | 降低上样量 |
2.上样速度过快 | 降低上样流速 | |
3.蛋白或脂类在介质中聚集 | 及时有效地清洗介质 | |
4.样品在储存或上样过程中失活 | 正确储存待纯化样品以维持样品的活性 | |
5.配基和目标物结合比例比较低 | 尝试加大偶联时配基浓度 | |
6.配基在偶联或清洗过程中降解 | 检测配基在偶联或清洗中的稳定性 | |
洗脱时没有收集到目标物 或只收集到少量目标物 | 1.目标物没有与介质结合或结合量较少 | 降低上样流速并检查介质的结合能力 |
2.洗脱条件不合适 | 更改相应洗脱条件或增强洗脱液的洗脱能力 | |
3.目标物在洗脱液条件下出现聚集沉淀 | 检测目标物在洗脱液条件（盐浓度和pH等）下的稳定性 | |
目标物纯度较低
| 1.样品没有经过前处理 | 样品上柱前必须要经过离心或过滤 |
2.样品粘度过高 | 用平衡液适当的稀释样品，降低粘度。 | |
3.洗杂不* | 加大洗杂体积直至基线平稳并与平衡液一致 | |
4.杂质蛋白或脂类在介质中聚集沉淀 | 及时有效地清洗介质 | |
5.洗脱条件不佳，洗脱速度太快、梯度太陡。 | 调整洗脱条件 | |
6.目标物出现降解 | 检测目标物的稳定性 | |
7.柱料装填效果不佳 | 重新装填或购买 | |
8.杂质出现非特异性吸附 | 适当选择添加剂降低非特异性吸附 | |
9.分离柱顶部有较大储样体积 | 重新装柱或降低储样体积 | |
10.介质中有微生物生长 | 介质使用完后，请及时正确保存介质 | |
介质载量下降 | 1.上样速度过快 | 降低上样流速 |
2.蛋白或脂类在介质中聚集，导致载量下降。 | 及时清洗介质 | |
3.使用次数过多，配基出现脱落 | 重新偶联新的介质 | |
4.样品在储存或上样过程中失活，不能较好的与配基结合 | 正确储存待纯化样品以维持样品的活性 | |
色谱峰上升缓慢 | 介质装填过紧 | 重新装柱 |
色谱峰拖尾 | 介质装填太松 | 重新装柱 |
柱床有裂缝或干涸 | 出现泄露或大体积气泡引入 | 检查管路是否有泄露或气泡，重新装柱 |
液流较慢
| 1.蛋白或脂类聚集 | 及时清洗介质或滤膜 |
2.蛋白沉淀在介质中 | 调整平衡液和洗脱液组分，以维持目标物的稳定性和介质的结合效率 | |
3.分离柱中微生物生长 | 所用试剂必须经过过滤和脱气； 样品上柱前必须离心或过滤 |
6.订购信息
表3：订购信息表
产品 | 规格(ml) | 货号 |
CNBr Focurose 4FF | 25 | HZ1001-2 |
CNBr Focurose 4FF | 100 | HZ1001-2 |
CNBr Focurose 4FF | 500 | HZ1001-2 |
CNBr Focurose 4FF | 1000 | HZ1001-2 |
备注：大规格包装产品或其它产品购买，请咨询本公司当地销售或售前技术支持。
