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LH-20 填料
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色谱柱类:美国热电ThermoFisher,、安捷伦(Agilent)、美国WATERS、瑞典Kromasil 、日本Cosmosil 、大赛璐(Daicel)、日本YMC 、日本TOSOH,日本三菱化学(MITSUBISHI CHEMICAL)、等。
标准品类:美国药典USP,欧洲药典EP, 英国LGC, 日本药典JP, 加拿大TRC,中检所
分离纯化填料:GE公司、富士填料(FUJI)、大曹填料(DAISO GEL),YMC公司填料,加拿大silicycle, 三菱化学树脂(MITSUBISHI CHEMICAL),罗门哈斯树脂(Amberlite)、国产树脂。
小型仪器:柱温箱、萃取仪、旋转蒸发仪、移液器。
德国徕卡Leica一次性刀片、冷冻包埋剂、切片石蜡、钢刀、盖玻片、防卷板、包埋模具、封片胶等病理耗材试剂
LH-20 填料
17-0090-02填料
全称为:羟丙基葡聚糖凝胶。常用商品凝胶的一种(另一种为交联葡聚糖凝胶Sephadex G)。Sephadex LH-20为Sephadex G-25(葡聚糖凝胶按交联度分类的其中一种商品型号)经羟丙基化处理后得到的产物,此时,葡聚糖凝胶分子中的葡萄糖部分将与羟丙基结合成下列醚键形式: -OH → -OCH2CH2CH2OH
与Sephadex G比较,Sephadex LH-20分子中 -OH 基总数虽无改变,但碳原子数所占比例却相对增加了,所以Sephadex LH-20不仅可在水中应用,也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合溶剂中膨润使用。
Sephadex LH20是一种价钱较高的填料,特点: 1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物 2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子 3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。
原理:
Sephadex LH-20的分离原理是根据分子大小,主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
洗脱溶剂:
Sephadex LH-20 洗脱溶剂因分为两类:反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以氯仿/甲醇溶解,过滤后,湿法上样。