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人ELISA试剂盒48T/96T 人ELISA检测试剂盒免费代测
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生产厂家上海研尊生物科技有限公司是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主营产品:生化试剂,标准品,对照品,PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海研尊生物科技有限公司先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
公司秉承“注品质、信守承诺、积沟通、创新服务”的企业文化积参与生物域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更业的服务!
公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。
人ELISA检测试剂盒免费代测
用途
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中浓度。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 4.5h |
反应性 | 通用 |
检测方法 | Colormetric |
灵敏度 | 检测下线除以10 |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
特异性 | 可检测样本中的指标,且与其它相关蛋白无明显交叉反应 |
重复性 | 板内,板间变异系数均<10% |
样品活化方法
生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测指标活性前必须进行活化处理。
活化方法如下:
血清、血浆: 280 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了10倍!
细胞培养上清:20 μL标准品&样品稀释液中加入100 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了2倍!
组织匀浆:1960 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀后检测。
注意:样品被稀释了50倍!
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
批内变异系数 | 批间变异系数 | |||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
数量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL) | 0.41 | 1.07 | 4.96 | 0.47 | 1.25 | 4.24 |
标准差 | 0.02 | 0.05 | 0.22 | 0.03 | 0.06 | 0.2 |
变异系数 (%) | 4.88 | 4.67 | 4.43 | 6.38 | 4.8 | 4.72 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
样本类型 | 回收率范围 (%) | 平均回收率 (%) |
血清(n=5) | 94-110 | 102 |
血浆(EDTA)(n=5) | 90-102 | 96 |
细胞上清(n=5) | 95-106 | 98 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
血清(n=5) | 血浆(EDTA)(n=5) | 细胞上清(n=5) | ||
1:2 | 回收率范围(%) | 99-108 | 95-105 | 92-104 |
平均回收率(%) | 105 | 102 | 97 | |
1:4 | 回收率范围(%) | 95-109 | 90-100 | 97-105 |
平均回收率(%) | 102 | 96 | 100 | |
1:8 | 回收率范围(%) | 89-103 | 89-104 | 96-108 |
平均回收率(%) | 97 | 97 | 102 | |
1:16 | 回收率范围(%) | 88-102 | 98-108 | 92-105 |
平均回收率(%) | 94 | 104 | 100 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 |
标准品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
酶标试剂 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
终止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
20×浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
人ELISA检测试剂盒免费代测
操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
试验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸