神经元尼氏染色实验服务

实验技术简介:

Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法，以发现Nissl小体和Niss变性而闻名。常用的碱性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺蓝)等。尼氏体为嗜碱性物质，又称嗜染质，光镜下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。在一些大型的运动神经元,尼氏体大而多，宛如虎皮花纹，又称“虎斑"。电镜下，尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间的游离核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一，神经元胞质另外一 特征性结构为神经原纤维。

实验技术原理:

正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体， 它们主要分布于神经细胞的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚甲蓝(methylene blue)甲苯胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin) 等钭其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内的尼氏体更可发生变化，严重的可消失。

实验操作流程:

1、切片脱蜡至水

2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脱水，二甲苯透明，中性树胶

实验结果:

神经细胞单位:紫-蓝色细胞核:紫蓝色尼氏体:紫深蓝色

实验操作流程:

1、切片脱蜡至水

2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脱水，二甲苯透明，中性树胶

实验注意事项:

客户提供:

1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg;

2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2x106个细胞于EP管，加入0 .5ml生理盐水或蛋白保护剂，混沟后保存于冰箱(-80°C, 避免反复冻融) ;

3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5m生理盐水或蛋白保护剂,保存(-80°C可长期保存,避免反复冻融) ;

4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可长期保存，避免反复冻融) ;

5、石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片等。

6、样本运输:可选择以下任何-种方式寄送标本

组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后，加冰袋寄送;

细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出) ;

血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2 -3天可到达)。

交付标准:

1、图片;

2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。

其他:

1、应用酒精分化切片，要迅速，防止过度分化，将切片上的颜色全部脱掉。