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沙门氏菌PCR检测试剂盒

型号
参数
供货周期:现货 规格:48T 货号:FS-02R6321 应用领域:化工 主要用途:公司产品仅供科研
上海抚生实业有限公司

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菌种,细胞,ELISA试剂盒,生化试剂,抗体,标准品,培养基

上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。


上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。

公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。






详细信息

参数规格:

产品名称:沙门氏菌PCR检测试剂盒

产品货号:FS-02R6321

产品规格:48T

产品分类:恒温荧光法

产品运输:低温运输
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实验过程:


一、试剂准备

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步骤

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

注意事项

1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。

2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

3.每次实验应该设置阴、阳性对照。

4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。

5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。

6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。

7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。

8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。

9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。

T4 Polynucleotide Kinase    2500 units

T4 DNA Ligase    1000 units

T4 DNA Ligase    5x1000 units

T4 DNA Ligase, HC    5000 units

T4 DNA Ligase    200 units

T4 DNA Ligase, LC    2x500 units

T4 RNA Ligase    1000 units

Endonuclease V, T.maritima    250 units

Micrococcal Nuclease    8000 units

Exonuclease III    4000 units

RNase H    100 units

RNase H    500 units

S1 Nuclease    10000 units

Uracil-DNA Glycosylase    200 units

Uracil-DNA Glycosylase    5x200 units

DNase I, RNase-free    1000 units

DNase I, RNase-free, HC    1000 units

DNase I, RNase-free (supplied with MnCl2)    1000 units

RNase A, DNase and protease-free    10 mg

RNase T1    100000 units

RNase T1    500000 units

RNase A/T1 Mix    1 ml

Lambda Exonuclease    1000 units

Lambda Exonuclease    5000 units

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操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。



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