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**色葡萄球菌PCR检测试剂盒
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生产厂家上海佰利莱生物科技有限公司是一家致力于化学与生命科学领域的高科技专业化公司,集研发、生产、销售于一体,提供高纯度有机化学试剂、分析试剂及研发用生化试剂等,客户遍布大专院校、科研院所的各课题组、以及不同规模企业的研发中心。目前我们提供超过12,000种自主品牌的产品,可广泛应用于有机合成、生物制药、分析检测、研发生产等领域,包装从毫克、克级到公斤级规格,我们正不断致力于以您的需求为导向,开发并提供更多的新产品、新包装、新服务。
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产品名称:**色葡萄球菌PCR检测试剂盒
产品规格:50T
注意事项:
1.基础程序,扩增温度和延伸温度,反应时间,循环次数,PCR反应液的配制,PCR技术的基本原理,PCR的反应动力学,PCR扩增产物,PCR反应体系与反应条件。
**色葡萄球菌PCR检测试剂盒
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,**色葡萄球菌PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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