线性PEI转染试剂

产品货号：P4000

存储条件：室温运输，粉末在室温或4 ºC保存，有效期2年。储存液 在4 ºC保存，有效期至少6个月。

产品简介：

Polyethylenimine Linear（PEI）溶液是由一种阳离子聚合物转染试剂，分子量40000，它能与核酸形成复合物，并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性PEI转染试剂适用广泛。该试剂可在含血清与抗生素的*培养基中发挥作用，即使在有血清存在的情况下，它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单，对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系，如HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等)，并且细胞毒性较低。

储存液配置（1 mg/mL）

1.材料

PEI 40000、Milli-Q® 水/注射用水（WFI）或类似的生物级水、1 mol/L氢氧化钠（NaOH）、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。

2. 配置储存液（1 mg/mL）

1）于1 L玻璃烧杯，将1g PEI 40000粉末加入900 mL Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水中，在磁子搅拌器上搅拌均匀，产生小涡；

2）待PEI 40000*溶解（通常不到5min）；

3）边搅拌边滴加1 mol/L氢氧化钠溶液，调节pH为6.90~7.10；

注：如果pH值>7.10，请使用盐酸将pH值调至6.90~7.10；

4）将溶液转入量筒内，并加水定容到1 L；

5）用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌，即得到1 mg/mL的储存液；

6）根据需要分装并储存在4 °C，至少6个月稳定。

操作流程（以6孔板为例）

1.细胞铺板

提前一天将细胞种植在六孔板中，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2.转染过程

1）在转染前2h，移除细胞上原有的培养基，换为新鲜的*培养基。

2）将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释，充分混匀制成DNA稀释液。

注意：无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O。

3）向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂，室温静置10~15min。转染复合物配制完成。

4）将转染复合物加入细胞培养基中，轻柔混匀。

5）继续培养24~48h，收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。

6）使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期，36~48h达到表达高峰，相对于脂质体转染试刘，达到峰值的时间延后约6~12h。

不同细胞培养容器转染用量：

注意事项：

1、对大多数细胞来而言，每1μg DNA 使用3.0μL PEI MAX转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1μg DNA使用 1.5~4 μL体积线性PEI 40000转染试剂进行优化。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

3、本产品仅用于科研用途，不可用于人体。