转染试剂（Lipo3000）
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详细信息
转染试剂Lipo3000
产品货号：TR002
存储条件：2-4℃保存1年。（避免冷冻）
产品说明
LABLEAD Lipo3000试剂采用了脂质纳米颗粒(Lipid Nanoparticle)LNP递送技术, 利用脂质形成纳米微粒将核酸包裹起来形成核酸脂质纳米粒，实现高转染性和可重复性的实验结果。其可针对广泛类型的常见及难转染细胞，实现超高转染效率，同时提供更高的细胞活力。Lipo3000对大多数细胞毒性低并且性质温和，并且我们优化了转染过程的全部四个步骤，并结合脂质体纳米颗粒(LNP)递送技术，实现了较高的转染性能并可以降低所需的试剂量，同时尽可能降低对细胞系产生毒性的风险。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。
产品特点：
1) 卓yue的转染效率—针对较难转染细胞，可将效率提升2～10倍
2) 作用温和，细胞毒性低—可改善细胞活力
3) 高性价比高，同时实现更好的转染结果
使用方法
DNA的转染
对大多数细胞来说，转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。
1.接种细胞至70-90%汇合度时转染。
2.按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂(建议同时用2管)，充分混匀
3.使用Opti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加Lipo3000-A 试剂，充分混匀。
4.在每管已稀释的Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例)。
5.室温孵育5分钟。
6.加入DNA-脂质体复合物至细胞中。
7.37℃孵育细胞2-4天。然后分析转染细胞。
siRNA转染
转染siRNA至细胞中时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA时不要加入Lipo3000-A试剂(第3步)。
| 细胞培养容器 | 96-well | 24-well | 6-well | |
| 贴壁细胞 | 1～4×104 | 0.5～2×105 | 0.25～1×106 | |
| Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂（建议同时用2管） | Opti-MEM培养基 | 5ul×2 | 25ul×2 | 125ul×2 |
| Lipo3000-B | 0.15和0.3ul | 0.75和1.5ul | 3.75和7.5ul | |
| Opti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加Lipo3000-A试剂，充分混匀 | Opti-MEM培养基 | 10uL | 50ul | 250ul |
| DNA (0.5–5 ug/ul) | 0.2ug | 1ug | 5ug | |
| Lipo3000-A试剂(2 ul/ug DNA) | 0.4ul | 2ul | 10ul | |
| Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例) | 稀释的DNA | 5ul | 25ul | 125ul |
| 稀释的Lipo3000-B | 5ul | 25ul | 125ul | |
| 室温孵育5分钟 | ||||
| 加入DNA-脂质体复合物至细胞中 | 96-well | 24-well | 6-well | |
| DNA-脂质体复合物 | 10uL | 50ul | 250ul | |
| 37°C孵育细胞2–4天。然后分析转染细胞。 | ||||
特别提醒：
本公司所有产品仅供专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。
常见细胞的转染效率（仅供参考，实验条件不同转染效率会有较大差别)
