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PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose系列采用了全新的INDIGO配基。这款产品能够在20 mM DTT和20 mM EDTA环境下稳定纯化带有His标签的蛋白（图1）。和其他市面上同类产品比较，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose的也具有更高的蛋白结合能力（图２）。

图1：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 适用于 20 mM EDTA和20 mM DTT环境体系。 SDS-PAGE显示通过E.coli 表达的GFP通过 PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose纯化（纯化体系含有20 mM EDTA和20 mM DTT）获得很高的产量(>80 mg/ml) 和很高的纯度。

图2：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 系列优于竞争者同类产品。His标签GFP 通过三种填料进行纯化. 缓冲液环境： pH 7.4, 10 mM DTT, 20 mM EDTA. 咪唑浓度: 结合: 10 mM, 清洗: 20 mM, 洗脱: 250 mM.

这款新型的INDIGO配基不会被EDTA洗脱，也不会在清洗的过程中被高pH的NaOH破坏。在不需要任何重生的前提下，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose可被反复使用８次以上，而其纯化的效率却没有任何降低（图３）。

图3：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 可被反复使用多次而无须再生，纯化效率并无明显变化. 8份同样的含有GFP样品通过1毫升 PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose进行纯化8轮纯化. 每轮之间纯化体系只简单使用缓冲液清洗（PBS 和10 mM咪唑）.

M: 参照

L: 细胞裂解液

S: 含有GFP的细胞裂解液

Cube Biotech提供的PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose是以50%悬浮液状态。为了方便通过Western Blot实验验证His标签蛋白，我们也提供高特异性His抗体—PentaHis antibody.

产品优势：

（1）100 µm 琼脂糖微球提供高流速；

（2）在去污剂和多种添加剂成分环境下依然保持有效，洗脱几次后其纯化的效率几乎不会降低，实用pH为４－９；

（3）高结合率（高达８０ mg/ml）和高纯度；

（4）高流速下仍保持高纯度蛋白纯化能力；

（5）即使在低目标蛋白浓度环境下保持高回收率；

（6）可直接适用于真核细胞培养液

针对pull-down实验，Cube Biotech同时提供新型PureCube INDIGO Ni-MagBeads磁性微球产品系列。此系列同样系列采用了全新的INDIGO配基并结合镍离子。此系列产品在高达20 mM DTT 和 20 mM EDTA环境体系里具有很高的目标蛋白结合能力（图4）。每批PureCube INDIGO Ni-MagBeads均以25%悬浮液状态出货。

图4：使用 PureCube INDIGO Ni-MagBeads来纯化His标签蛋白，即使在高达10 mM DTT和 20 mM EDTA的环境下仍可以得到很高的产量和纯度：15 mL E.coli 细胞裂解液含有重组绿色荧光蛋白（GFP）和人 JNK1蛋白通过 250 µL PureCube INDIGO Ni-MagBeads 纯化. 整个实验过程中使用的缓冲液含有 10 mM DTT 和 20 mM EDTA. 每毫升磁珠最终纯化总量 89 mg 的GFP 和48 mg JNK1 . （MW: 分子量; E1-E3: 洗脱部分 1-3）

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