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Cas9x3.0 CRISPR基因敲除试剂盒
- 型号
- Cas9x3.0
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苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年，位于苏州园区生物纳米园（Biobay）A5幢301室。公司管理团队专注于科学仪器行业十三年，拥有专业的技术团队与完善的售后服务体系，目前已为300余家实验室提供优质产品和服务，涵盖各大高校、医疗机构、检测中心、科研机构、制药企业等13个群体。代理的实验室仪器主要包括振荡培养箱，PCR仪，移液器，生物反应器，发酵罐，移液器，超低温冰箱，医用冰箱，液氮罐，高压灭菌器，超纯水机，天平，离心机等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱，梅特勒，乐枫，搏旅、NEST、天根、奥盛在内等多家等。在提供产品的同时也为您提供生物实验室常用的耗材试剂，以及实验室整体搬迁、第三方检测、计量与校准，二手仪器调剂等服务。完整的实验室一站式体验使您的选择更加方便、快捷、灵活。
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详细信息
CRISPR基因敲除试剂盒
| 产品名称：CRISPR基因敲除试剂盒
| 产品货号：Cas9x3.0
| 产品介绍
该试剂盒(Cas9x3.0)是海星生物在多年基因编辑服务的基础上研发的高效快捷的基因敲除试剂盒。包括了人(Human) 和小鼠(Mouse)的所有基因的敲除。
Cas9x3.0试剂盒包含2个Cas9X™算法优化的 gRNA序列载体和特异的同源DNA片段，DNA片段含有抗性和GFP 荧光，并携带有一段特殊同源序列，不仅可为后续基因敲除细胞的筛选提供药物抗性，也可以通过流式筛选获得敲除细胞。
Cas9x3.0试剂盒对分裂细胞和非分裂细胞都有非常高的敲除效率。
| 产品特点
敲除高效率——比病毒敲除方式更实惠、更稳定、更安全
实验超简单——操作流程简单，能养好细胞就能做基因敲除
| 产品构成
| 产品原理
Cas9x3.0试剂盒依据HDR和 NHEJ修复原理进行产品开发。
优化的gRNA引导Cas9蛋白对特定位点进行切割，产生DNA 双链断裂（Double-Strand Break, DSB），并诱导同源线性化DNA片段（携带抗性基因和荧光基因）整合到该位点，再通过抗性药物（puroR ）或荧光（GFP）进行筛选，从而获得基因敲除的细胞和单克隆。
该试剂盒 (Cas9x3.0) 的敲除效率是传统基因敲除策略的2~5倍。因为的除策略是通过在基因位导入 Donor DNA（ puroR & GFP ）从而达到敲除目的蛋白效果，同时也可以在DSB位点导入序列移码，导致蛋白翻译提前终止。这两个原理的叠加，可以轻松获得“等位基因”纯合敲除细胞株。
| 应用流程
该基因敲除试剂盒 (Cas9x3.0)操作步骤(脂质体转染法)：
本试剂盒建议采用转染试剂是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030)，具体参照转染试剂说明材料。不同类型的转染试剂，请按照制造商的操作说明进行转染。
注意：悬浮细胞不推荐使用脂质体转染法。
基因敲除试剂盒 (Cas9x3.0)操作步骤(电转化法)：
本试剂盒推荐Neon转染系统，具体参照设备对每种细胞参数。不同类型的电转设备，请按照制造商的操作说明进行优化。
注意：悬浮细胞推荐使用电转化法。
该基因敲除试剂盒 (Cas9x3.0)配有eGFP对照DNA，可以按照实际使用的方法和细胞情况，进行实验摸索，建议48小时后的目的细胞的eGFP的阳性率不低于50%， Cas9x3.0试剂盒才能获得良好的敲除效果。
