小鼠角膜上皮细胞永生化
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经销商上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!
公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。
细胞详述
角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同,中央部最薄。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。
角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
注意事项: 收到细胞后第一次传代建议1:2传代,充液培养基是维持培养基,不能用来培养细胞。
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常眼组织。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
小鼠角膜上皮细胞永生化 | 1×106 | A01X1231 |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品:
兔血管外膜成纤维细胞 | CHO/dhFr-仓鼠卵巢,二氢叶还原缺陷细胞专用培养基 |
EFHC1蛋白抗体 | AF555标记的FAM108A1蛋白抗体 |
PC12低分化大鼠肾上腺嗜铬瘤 低分化 细胞专用培养基 | AF555标记的四度跨膜蛋白3抗体 |
PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬瘤低分化+GFP细胞专用培养基 | AF555标记的杀菌肽B/天蚕抗菌肽B抗体 |
PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬瘤低分化+GFP细胞专用培养基 | AF555标记的精子赤道区域蛋白1抗体 |
PC12高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤 高分化 细胞专用培养基 | AF555标记的血管生成样蛋白2抗体 |
PC12高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤 高分化 细胞专用培养基 | AF555标记的G蛋白偶联受体137抗体 |
PC12未分化大鼠肾上腺嗜铬瘤 未分化 细胞专用培养基 | AF555标记的肿瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激结合蛋白抗体 |
PC12未分化大鼠肾上腺嗜铬瘤 未分化 细胞专用培养基 | AF555标记的多肽N-乙酰氨基半乳糖转移1抗体 |
RBL-2H3大鼠嗜碱性白血病细胞专用培养基 | AF555标记的调节元件结合蛋白1抗体 |
RBL-2H3大鼠嗜碱性白血病细胞专用培养基 | AF555标记的小鼠抗聚组氨单克隆抗体 |
RH-35大鼠肝癌细胞专用培养基 | 小鼠角膜上皮细胞永生化AF555标记的脂氧受体1抗体 |
RH-35大鼠肝癌细胞专用培养基 | AF555标记的胰腺激抗体 |
RIN-m5f大鼠β胰岛瘤细胞专用培养基 | AF555标记的磷化造血祖细胞激抗体 |
CHO仓鼠卵巢 细胞专用培养基 | AF555标记的接头蛋白DOK7抗体 |
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。