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重组片段抗体定制服务
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泰克生物科技（天津）有限公司致力于为客户提供基于噬菌体展示和纳米抗体研发平台的定制服务，泰克生物的研发团队在抗体发现、重组抗体开发和噬菌体文库构建和筛选方面拥有丰富的经验。我们的服务包括使用各种抗体库技术（包括噬菌体展示、细菌展示和酵母展示）生产人、猴、兔、牛、羊、羊驼和骆驼单克隆抗体。此外，泰克生物拥有的抗体发现和噬菌体平台可以提供：抗体偶联药物发现服务、CAR候选分子发现服务以及相关的抗体测序和亲和力测定服务；纳米抗体文库构建与筛选服务，噬菌体文库构建和筛选服务以及抗体亲和力成熟等相关服务。
泰克生物的科学家致力于为战胜癌症以及各种疾病提供生物学研究方法和服务。泰克生物的科学家认为，建立以客户服务为中心的运营模式对于优化药物开发流程，同时组建不同研究领域背景的团队进行未来的药物发现和癌症研究具有重要意义。泰克生物的这一长期发展目标激励着我们为客户提供优质的技术服务和研究成果。
详细信息
抗体/抗体片段抗原产生特异性和高效结合性，在生化、治疗和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术，由于其自身研发周期比较长，生产的成本相对较高，已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来，随着基因重组和生物工程技术的不断进步，高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。
抗原结合片段 （Fab） 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段（scFv），其大小只有Fab片段的一半，但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段，单域抗体，又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb，是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段，缺少常规的轻链和重链的CH结构域。
泰克生物是一家专业的CRO服务提供商，能为我们的客户提供高质量的重组片段抗体定制服务，如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外，泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心，能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。
█ 抗体片段特性
抗体类型 | 组分 | 分子量（kDa） | 化合价 | 半衰期（h） |
Fab | VH+CH1+VL+CL （轻重链利用二硫键连接） | 50-55 | 单体 | 12-20 |
scFv | VH+VL | 30 | 单体 | 2-4 |
sdAb | VHH | 15 | 单体 | 0.5 |
Fc融合抗体 | （抗体+CH2+CH3）*2 | / | 二聚体 | / |
di-scFv | scFv*2 | 60 | 二聚体 | 4-8 |
█ 抗体片段表达系统常用宿主
表达系统 | 菌株/细胞 | 特点 |
E.coli | BL21（DE3） | Ion-ompT，有效防止重组蛋白在胞内被水解 |
Rosetta | ||
哺乳动物细胞 | CHO-S | 是实验室常用的细胞系，作为贴壁和悬浮培养生长良好，生产率高，是大规模培养和GMP程序的理想选择；可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药，显示出的生物相容性和药物活性；适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件，并具有更好的稳定性和安全性。 |
CHO-K1 | ||
Freestyle 293F | 是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系，可以高效表达蛋白。 | |
Expi 293F | 具有高度可转染行，展示出较高的蛋白表达水平，相比标准的悬浮适应293细胞，表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。 |
█ 抗体片段高表达策略
优化方式 | 特性 |
融合抗体 | Fab 基因表达时，5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因，可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达，形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上，然后共转染细胞，也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。 |
抗体序列本身的修饰 | 经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸，从而优化其稳定性，增强与抗原的亲和性，提高表达产量。 |
表达系统的选择 | 应考虑的因素有：实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。 |
密码子优化 | 天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好，使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。 |
条件优化 | 需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。 |
█ 抗体表达服务内容
实验内容 | 交付 | 周期 |
基因合成＆载体构建 | 1. 重组抗体 2. 表达载体 3. 克隆菌株 4. 实验报告 | 6-8周 |
质粒抽提 | ||
细胞转染＆表达抗体 | ||
抗体纯化（SDS-PAGE） |
█ 泰克可提供的服务
片段抗体构建和生产服务
片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体（驼源纳米抗体）等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列，交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息，则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。
重组抗体293F/CHO细胞表达服务
全套Gibco无血清哺乳细胞培养，适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求，如糖基化修饰，磷酸化修饰等。为客户提供满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程，全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。
█重组片段抗体定制服务优势
✔ 详细的实验设计和论证：包含稀有密码子分析，抗体序列分析，表达系统的选择，表达载体构建方案，抗体修饰等
✔ 多种标记抗体表达：His标签融合表达，同位素标记表达
✔ 多个种属的重组抗体制备：包括人源，鼠源，兔源，羊源，犬源，骆驼源，羊驼源，牛源等
✔ 抗体修饰控制：糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制
✔ 多重表达模式：稳定表达和瞬时表达
✔ 配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系
✔ 低内毒素水平：LAL检测法<0.1EU/ug
✔ 完整的文件追溯体系，保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯
