酵母营养缺陷型培养基配制

液体培养基：

8g粉状培养基LABLEAD系列选择培养基加950 ml水,常规高压灭菌后再加50ml 40%过滤除菌的无菌葡萄糖。（备注：YPD、YPDA和YPD plus这三种系列不需要再加糖，直接按瓶子上标签指示加水配制即可）。配制液体培养基不需要调pH，因为酵母偏好酸性条件生长。如果为了实验方便，葡萄糖也可按2%的量以粉末的形式加进去高压灭菌（见下面标准配制法注解）。

固体培养基：

8g粉状培养基加950 ml, 用NaOH调pH至大致范围5.8~6.5, 然后按20g/L加琼脂粉, 高压灭菌后再加预温的50ml 40%无菌葡萄糖, 摇匀后倾倒平皿(备注:如不调pH, 琼脂在酸性条件下会产生崩解)。如果为了实验方便，葡萄糖也可按2%的量以粉末的形式加进去高压灭菌。

标准配制法：

标准流程要求葡萄糖过滤除菌，因为葡萄糖与培养基中的氨基酸在高温高压下发生化学反应。但有些实验者为方便起见，将固体葡萄糖按2% 的量(按每升20克)直接加到培养基后一起高压灭菌，虽然酵母也可以生长，但一般不推荐这种将葡萄糖高压灭菌的方法。如果实在要图省事想用这种方法，那么一定要控制好高压时间在18-20min结束，待压力下降和温度降到安全范围后应尽快取出。否则液体颜色会变成黄色而对酵母特性发生不可预知的影响。但半乳糖和棉子糖不能高压灭菌，只能用过滤除菌制备，建议制备高浓度40%的储存液，按计算好的体积加到高压灭菌的培养基使得终浓度为2%。

说明：

用于组成型表达（如酵母双杂交、酵母单杂交）以及其它采用组成型启动子的实验一般都加葡萄糖；诱导型表达如采用GAL1启动子载体的表达一般都加半乳糖和棉子糖。葡萄糖可以勉强高压灭菌，但半乳糖和棉子糖是绝对不能高压灭菌的, 应采用无菌过滤法先制备40%的无菌储备液，待不含糖的培养基高压灭菌后按最终应用浓度为2%的量计算需要加入的无菌液体糖储存液：

如配制1升培养基则称取8克培养基加水950 ml，常规高压灭菌（121°C 20min）完成后待温度降至安全范围70°C时趁热立刻加入50ml 40%过滤除菌的无菌糖，充分混匀。