11803ES DH5α Fast Chemically Competent Cell F
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
产品简介
本产品采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到得感受态细胞，可用于DNA的化学转化，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传，适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。F-DH5α感受态细胞经特殊工艺制作，无需42℃热激，37℃孵育，只需10 min即可完成一次转化。使用pUC19质粒检测，转化效率约达108 cfu/μg DNA。
DH5α细胞基因型：F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1phoA
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 11803ES80 |
11803-A | F-DH5α 感受态细胞 | 10×100 μL |
11803-B | pUC19 (control vector, 10 pg/μL) | 10 μL |
储存条件
-85℃~-65℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或液氮中保存。
使用方法
快速转化操作方法（10 min）
1）提前15分钟将用到的筛选培养基平板拿到37℃预热。
2）将F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出迅速插入冰上，待菌体融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），轻轻弹匀，冰浴静置5 min。
*所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3）用200 μL移液枪将上一步的混合物转移到已经37℃预热的LB培养基上，均匀涂布。
4）将平板置于37℃培养箱倒置过夜培养。若进行蓝白斑筛选操作，平板在37℃至少倒置培养15 h。
快速热激转化操作方法（25 min，可提高转化效率）
1）将F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出迅速插入冰上，待菌体融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），轻轻弹匀，冰浴静置5 min。
*所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2）42℃水浴热激45 sec，迅速插回冰上静置2 min，此过程不要晃动。加入700 μL不含抗生素的LB，37℃，200 rpm复苏10分钟，均匀涂板。
3）将平板置于37℃培养箱倒置过夜培养。若进行蓝白斑筛选操作，平板在37℃至少倒置培养15 h。
常规热激转化操作方法
1）将F-DH5α感受态细胞从-80℃拿出迅速插入冰上，冰浴、解冻（大约5 min）。
2）立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置25 min。
*所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3）42℃水浴中热激45 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。
*此过程不要晃动，否则会降低转化效率。
4）向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。
5）5,000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。如进行蓝白斑筛选操作，请将平板放 37℃培养至少15 h。
注意事项
1. 本产品不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。
2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率高。
3. 加入质粒应轻柔操作。
4. F-DH5α感受态细胞既可以快速转化也可以常规热激转化，对于>7 kb质粒的构建，为提高转化效率，可采用常规转化方式进行转化。
5. F-DH5α感受态细胞涂氨苄/羧苄抗性平板时效率较高，若涂或其他抗生素平板，转化效率下降（无孵育步骤，等对菌体毒性较大）。若要提高或其他抗性质粒的转化效率，可增加孵育步骤。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7. 本产品仅作科研用途！
