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水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱仪
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详细信息
水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱仪
规范性引用文件
GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
方法提要
试样中的阿维菌素用丙酮提取，经浓缩后用 SPE C 18 柱净化，并用甲醇洗脱。洗脱液经浓缩、定容、过滤后，用水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱仪配有紫外检测器的高效液相色谱测定，外标法定量。
试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 中规定的一级水 。
试剂丙酮 C 3 H 6 O 色谱纯。
甲醇 CH 4 O 色谱纯 。
标准品
阿维菌素标准品 （分子式 C 48 H 72 O 14 ））：纯度 96.0% 。
标准溶液配制
阿维菌素标准储备液：称取 0.1 g( 准确至 0.0002 g ) 阿维菌素标准品于 100m L 容量瓶中 , 用甲
醇溶解并定容至刻度配制成浓度为 1.0 mg/mL 的标准储备液。
阿维菌素标准工作液 根据需要移取适量的阿维菌素标准储备液 用甲醇稀释成适当浓度的标
准。标准工作液需每周配制一次。
仪器和设备
高效液相色谱仪：配有紫外检测器
分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g
组织捣碎机。
振荡器。
旋转蒸发器。
固相萃取柱： SPE C 18 。规格： 60 mg/3 mL 使用前用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化。
试样制备与保存
试样制备
将所取样品缩分出1 kg ，取样部位按 GB 2763 附录 A 执行 样品经组织捣碎机捣碎，均分为两份，装入洁净容器内，作为试样密封并标明标记。
试样保存
将试样于18 ℃以下保存。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
分析步骤
提取
称取试样约20 g （精确至 0.1 g ）于 100 mL 具塞锥形瓶中，加入 50 mL 丙酮，于振荡器上振荡 0.5h 用布氏漏斗抽滤，用 20 mL × 2 丙酮洗涤锥形瓶及残渣。合并丙酮提取液，于 40 ℃水浴旋转蒸发至约2 mL 。
净化
将上述的浓缩提取液转入SPE C18 柱，再用 5 mL 水淋洗，去掉淋洗液。最后用 5 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液，用氮气吹至近干。准确加入 1.0 mL 甲醇溶解残渣， 用 0.45 μ m 滤膜过滤 , 滤液供液相色谱测定。外标法定量。
测定
高效液相色谱 参考 条件：
色谱柱： ODS C 18 反相柱， 4.6 mm × 125 mm
流动相：甲醇：水 90+10, V/V
流速： 1.0 mL/min
检测波长： 245 nm
柱温： 40
进样量： 20 μ L 。
色谱测定
根据样液中阿维菌素含量情况，选定峰高相近的标准工作液标准工作液和样液中阿维菌素响应值均应在仪器检测线性范围内，标准工作液和样液等体积参插进样。在上述色谱条件下，阿维菌素保留时间约为 5.3 min 。
标准色谱图参见附录
A ，标准品紫外光谱图参见附录 B 。
