60724ES （FC）含量检测试剂盒 微量法
该企业相似产品
企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
产品简介
游离胆//固//醇(FC)是构成细胞膜的主要成分，也是合成性激素、胆汁酸、维生素D和肾上腺皮质激素等物质的重要原料，FC浓度可作为脂代谢的指标。本试剂盒的检测方法是微量法，既可以用可见分光光度计检测，也可以用酶标仪检测。该产品的检出限是0.119 μmol/mL，线性范围为0.125-6 μmol/mL。
作用原理是FC氧化酶可催化FC生成4-胆甾烯酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安//替//比//林和酚生成红色醌类化合物，其在500 nm有吸收峰，颜色深浅与FC含量成正比。作用方式如下：
测定总胆//固//醇(TC)请选择60723ES 总胆//固//醇(TC)含量检测试剂盒；测定游离胆//固//醇(FC)请选择60724ES 游离胆//固//醇(FC)含量检测试剂盒。
产品信息
货号 | 60724ES60 |
规格 | 100 T |
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 规格 | 储存条件 |
60724-A | 工作液 | 20 mL | 2~8℃ |
60724-B | 标准品 | 10 mg | 2~8℃ |
储存条件
2~8℃保存，有效期6个月。
使用说明
【注意事项】实验之前建议选择3个预期差异大的样本做预实验，如果样本吸光值不在测量范围内，建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和溶剂：
可见分光光度计/酶标仪、天平、低温台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、可调式移液枪、EP管、蒸馏水和异丙醇。
溶液的配制：
1）自备提取液异丙醇：大约需要110 mL，常温保存；试剂盒内提供一个30 mL棕色空瓶，仅做分装使用。
2）标准品溶液的配置：10 mg胆//固//醇使用前加入517 μL提取液，振荡溶解后即为50 μmol/mL的胆//固//醇标准溶液，2~8℃可保存4周。
3）标准溶液的稀释：取50 μmol/mL胆//固//醇标准液20 μL ，加入480 μL异丙醇，充分混匀，配制成2 μmol/mL的标准液。注意2 μmol/mL标准液最好现配现用，实验中每管需10 μL，但为减小实验误差，故配制体积偏大。
3. 操作步骤
1）样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
a. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约0.1 g组织，加入1 mL提取液）进行冰浴匀浆。8000 g，4℃离心10 min，取上清置冰上待测。
b. 细菌/细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1 mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300 w，超声2秒，间隔3秒，总时间3 min）；然后 8000 g，4℃离心10 min， 取上清置于冰上待测。
c. 血清（浆）等液体样本：直接测定，若有沉淀请离心后取上清待测。
2）测定步骤
a. 可见分光光度计/酶标仪预热30 min以上，调节波长至500 nm，分光光度计蒸馏水调零。
b. 按需取出一定量的工作液，37℃水浴预热30 min。
c. 在1.5 mL EP管/96孔板按下表步骤加样
试剂名称（µL） | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
异丙醇 | 10 | - | - |
标准液 | - | 10 | - |
待测上清 | - | - | 10 |
工作液 | 190 | 190 | 190 |
充分混匀，室温静置15 min，反应完成后测定500 nm处吸光值A，分别记为A测定、A标准和A空白，ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。空白管和标准管只需测1-2个。注：若样本为血清，则空白管中的提取液（异丙醇）需要更换为蒸馏水进行实验。 | |||
总胆//固//醇含量计算
a. 血清（浆）中 FC 含量计算：
FC含量（μmol/dL）=C标准液×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）×100=200×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）
b. 组织或细胞、细菌中 FC 含量计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：FC含量（μmol/mg prot）=C标准液×（A测定-A空白）÷（A标准-A 空白）×V样总÷（Cpr×V样总）=2×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）÷Cpr
（2）按样本质量计算：FC 含量（μmol/g 质量）=C 标准液×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）×V样总÷W=2×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）÷W
（3）按细胞/细菌数量计算：FC 含量(μmol/104 cell）=C 标准液×(A测定-A空白）÷（A标准-A空白）×V样总÷N=（A测定-A 空白）÷（A标准-A空白）
C 标准液：标准液的浓度，2 μmol/mL；V 样总：加入提取液的体积，1 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；100：单位换算系数，1 dL=100 mL；500：细菌或细胞数量，500万；N：细胞数量，以万计。
4. 实验实例：
取 0.1 g 大鼠肝脏加入 1 mL 提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，使用 96孔板测得A空白=0.046、A标准=0.354、A测定=0.127，按样本质量计算含量得：
FC含量（μmol/g 质量）=2×（A测定-A空白）÷（A标准-A空白）÷W =5.320 μmol/g 质量。
注意事项
如果样本吸光值大于1.2，建议将样本用提取液稀释后进行测定。
提取液中含有使蛋白变形的成分，故按蛋白浓度计算时需要重新提取蛋白进行测定。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途！
