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PC0020 索莱宝 BCA蛋白浓度测定试剂盒-常备现货

型号
PC0020
参数
供货周期:现货 规格:50T/10*50T 货号:PC0020 主要用途:BCA蛋白浓度测定试剂盒
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详细信息

Solarbio/索莱宝  PC0020  BCA蛋白浓度测定试剂盒

 

索莱宝  BCA蛋白浓度测定试剂盒-常备现货

产品货号:PC0020

产品名称:BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品规格:50T/10*50T

产品简介:

BCA Protein Assay Kit

 

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

规格:50T(500微孔) ; 10*50T500微孔)

储存条件:BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期1

碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+ Cu+BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDSTriton X-100Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

. 微孔酶标仪法

1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL

3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

. 分光光度计法 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下:

1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品:取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL

3. 取八支(或者更多)5mL离心管,标上号,按下表加入试剂。

离心管号

1

2

3

4

5

6

7(样品管1

8(样品管2

9(样品管3

标准蛋白BSA

0

40μL

80μL

120μL

160μL

200μL

200μL适当稀释的样品1

200μL适当稀释的样品2

……

PBS

200μL

160μL

120μL

80μL

40μL

0

0

0

0

BCA工作液

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

 

4.37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项:

1. 长期不用时,Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温育使其wan全溶解, 不影响使用。

2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


索莱宝  BCA蛋白浓度测定试剂盒-常备现货 

产品订购信息:

PC0020  BCA蛋白浓度测定试剂盒  50T/10*50T

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