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胶原酶 4 型(生化试剂)

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武汉艾美捷科技有限公司

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随着公司业务的壮大,为了更好的服务客户,公司组建了一支在生物领域经验丰富的研发团队-艾美捷生物技术中心,宣布进入自主研发阶段,以期将更多更优质的产品*给国内生物领域的同仁。相信在不久的将来,将陆续有印有艾美捷Logo的产品与大家见面,并逐渐受到大家的认可!

 

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详细信息

胶原酶是消化三螺旋区天然胶原蛋白的内肽酶。胶原是动物细胞外结缔组织的主要纤维成分。细菌胶原酶与脊椎动物胶原酶的不同之处在于,它们表现出更广泛的底物特异性(Peterkofsky 1982,Birkedal-Hansen 1987)。与以天然三螺旋构象分裂胶原的动物胶原酶不同(Woolley等人1975,Gross等人1974),细菌胶原酶是d特的,因为它可以降解可溶性天然胶原和水溶性变性胶原中的水。它可以攻击几乎所有类型的胶原蛋白,并能够在三螺旋区域内进行多次裂解(Mookhtiar和Van Wart 1992)。


无动物源类型AFA、AFB和AFC,STZ1和STZ2胶原酶是从w全不含动物成分的培养基中培养出来的,设计用于生物加工应用,其中必须防止潜在的动物源性病原体的引入。次级蛋白酶的水平与类型1和2胶原酶相似。

- CLSAFA是原始的AFA等级,设计为具有与类型1和2胶原酶相似的胶原酶和次级蛋白酶。

- CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。

- CLSAFC具有类似于类型4胶原酶的特别低的y蛋白酶活性。

- CLSAFD含有比CLSAFA高两到三倍的特定活性。

- 纯化胶原酶,代码CLSAFP含有Z少的次级蛋白水解活性以及高胶原酶活性。

- STZ1和STZ2,0.22μ过滤STEMxyme AOF胶原酶/z性蛋白酶(Dispase)混合物,用于原代细胞和干细胞的分离。


胶原酶 4 型(生化试剂)


作为Biogradetech-d 家代理,艾美捷科技强烈推荐Biogradetech热销产品胶原酶,4 型产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

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胶原酶,4 型BGT-PEN-102查看


胶原酶,4 型特异性:

French等人(1992)确定了I类和II类酶最初攻击所有三种胶原类型的高反应位点。切割位点都在重复的Gly-X-Y胶原序列中的Yaa-Gly键上(Barrett 1998)。梭菌胶原酶将天然的三螺旋I、II和III型胶原消化成小肽混合物的能力是其主要区别因素。这是通过在三重螺旋中进行多次切割来实现的。消化是通过将这些片段水解成小肽的混合物来完成的。相反,脊椎动物的胶原酶通过在所有三条α链上进行一次断裂来启动胶原蛋白分解,之后对这些α链的攻击非常有限。然后,只有在三螺旋变性后,明胶酶和其他蛋白酶才能进行胶原分解(Barrett 1998)。[UNK]


分子特征

胶原酶是由溶组织梭菌中两个不同的基因产生的。这两个基因都已被克隆和测序(Yoshihara 1994)。colG基因编码I型胶原酶,一种936个氨基酸的肽。colH基因编码II型胶原酶,一种1021个氨基酸的肽。这些基因共享72%的同一性,而蛋白质共享43%的同一。两种基因产物都可以以分子量不同的两种或多种异构体的形式存在。因此,粗胶原酶混合物可以包含6至8种不同分子量的种类,其范围为68至130kDa。底物特异性研究表明,与colH基因产物相比,colG基因更喜欢天然底物,如完整的胶原蛋白。相反,相对于colG基因产物,colH基因产物优先作用于短合成底物(FALGPA)(Eckhard等人2009和Matsushita 1999)。


应用

从肺、上皮和肾上腺组织中分离脂肪细胞、肝细胞和细胞

从骨骼、软骨、肌肉、甲状腺和内皮中分离心肌细胞和细胞

分离乳房和其他各种软组织

人和猪胰岛细胞的分离(Kin 2007)

用粗胶原酶及其蛋白水解活性的混合物处理组织,可以温和、选择性地消化细胞间基质,对细胞几乎没有损伤或丧失活力

AFA胶原酶适用于需要避免将动物源性病原体引入生物加工程序的应用


对于胶原结构和生物合成研究,研究人员通常使用不含其他蛋白水解活性的更高纯度胶原酶制剂。

对于组织解离,大多数研究人员使用粗胶原酶制剂,如CLS1、CLS2、CLS3和CLSAFA,以及其他酶,如弹性蛋白酶、y蛋白酶和/或木瓜蛋白酶。


分子量:68-130 kDa

Z佳pH值:

6.3-8.5 (Soru和Zaharia 1972)

等电点:

5.63 (ColG, 理论值)

5.58 (ColH, 理论值)

消光系数:

159,970 cm^-1 M^-1 (ColG, 理论值)

150,130 cm^-1 M^-1 (ColH, 理论值)

E1%,280 = 13.20 (ColG, 理论值)

E1%,280 = 13.40 (ColH, 理论值)


激活剂:Ca2+、Zn2+

抑制剂:

EDTA, EGTA

半g氨酸,z氨酸

DTT(二硫苏糖醇)


邻苯二酚

Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+

不被DFP或血清抑制


Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。


胶原酶 4 型(生化试剂)

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