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无细胞合成蛋白
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生产厂家无细胞合成蛋白是一种在体外直接合成蛋白质的技术,无需依赖完整的活细胞。该技术通过提取细胞内的核糖体和其他必要的调控因子,并辅以氨基酸、核苷酸等原料,从而在体外实现蛋白质的快速合成。
技术原理
基本原理:无细胞合成蛋白系统(CFPS)模拟了细胞内的转录和翻译过程,通过添加模板DNA或mRNA以及必需的底物和能量物质,在体外直接合成蛋白质。
发展历程:该技术自20世纪60年代兴起,经过六十多年的发展,尤其是近二十年的快速增长,已经具备工业化基础。
技术优势
高效快速:传统哺乳动物细胞表达需要3-7天,而无细胞合成系统只需3-5小时即可完成,大幅提升了效率。
还原度高:该系统合成的蛋白纯度高,且能够真实表现抗体活性,例如义翘神州利用该技术制备的VHH,其纯度和活性均达到高标准。
突破限制:无细胞系统能够合成在真核细胞中难以表达的抗体片段,突破了传统表达系统的局限。
应用领域
抗体工程:无细胞蛋白合成被广泛应用于抗体及抗体片段药物的研发,被认为是抗体工程的“GameChanger”。
酶生物:该系统也被用于酶的高通量筛选和进化研究,显著提高了酶制剂的生产效率。
疫苗开发:像Vaxcyte这样的公司就利用该技术构建了新型疫苗,进一步拓宽了无细胞合成蛋白的应用范围。
一、产品介绍
PLD无细胞蛋白表达试剂盒能够替代原核蛋白表达系统,让蛋白表达像做PCR一样简单、高效、快捷,快1小时即可产出蛋白,蛋白产量高可达3mg/mL!
试剂盒仅需加入蛋白基因(PCR产物或环状质粒)即可通过“一锅式”反应(转录和翻译偶联),快速、高效地表达目的蛋白。
试剂盒中提供的无细胞反应体系除目的蛋白基因外,含有体外转录和翻译所需的全部酶、能量、氨基酸、核苷酸、无机盐等,操作简便,表达效率高。已被国内诸多医药研发企业内部验证并推广使用。
二、产品特色
反应速度快
快1小时即可检测到目的蛋白,10小时蛋白合成达到峰值
操作简单
一步反应,仅需将反应组分与DNA模板混合即可制备蛋白
模板灵活
支持质粒模板以及PCR模板
高通量
可在96孔板中进行表达筛选,当检测到阳性表达后,可进行体系放大
表达量高
高可实现3mg/mL以上产率的蛋白制备
蛋白共表达
可在同一反应中,同时表达多种蛋白
适用蛋白种类多
可表达各种类型的蛋白,包括富含二硫键的蛋白、膜蛋白等
三、案例数据
PLD无细胞蛋白表达试剂盒具有出色的蛋白表达性能,蛋白产量高可达3~5 mg/mL。将试剂盒组分与常见的荧光蛋白质粒混合后,30℃孵育后的效果,无需紫外光照射,即可观察到由大量荧光蛋白发出的荧光(图1A)。
本产品具有优异的批次间重复性与稳定性。在常规实验室条件下,即可实现从μL级到 mL 级反应规模的线性放大(图1B)。
图1 PLD无细胞蛋白试剂盒产品性能展示
四、产品性能、清单及反应体系参考
应用场景:
苏州珀罗汀生物技术有限公司是一家专业的无细胞蛋白表达生物技术公司,自主研发无细胞蛋白表达系列产品,为广大生物医药企业和研究机构快速表达蛋白以及搭建无细胞平台提供帮助!