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参考价:¥8002200

AC04L061、AC04L062 EZ Trans mRNA转染试剂

型号
AC04L061、AC04L062
规格
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参数
供货周期:现货 规格:300uL、1mL 货号:AC04L061、AC04L062 应用领域:生物产业
和元李记(上海)生物技术有限公司

高级会员8年 

生产厂家

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  公司前身为上海李记生物科技有限公司,成立于2015年。和元李记在2023年由和元生物和李记生物合资成立,是集研发、生产、销售为一体的国产生物试剂公司,专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供技术优秀 、方便易用、经济高效的产品,产品范围包括:细胞生物学、分子生物学、免疫学和生物化学相关的实验试剂及试剂盒。

  目前在全国40余座城市均有授权代理;直接服务终端超千家,涵盖CRO、药企、高校、医院和科研院所;李记产品已帮助客户发表数百篇SCI,多篇CNS。

  优势产品:蛋白Marker、EZ Trans细胞转染试剂、CCK-8、支原体快速检测试剂盒、核酸染料(GelRed/GelGreen)、EZ Protein any KD PAGE蛋白电泳试剂盒、荧光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、细胞凋亡检测试剂盒等。

详细信息

产品描述

信使核糖核酸(mRNA)在细胞质中启动蛋白质翻译,不需要进入细胞核,可实现比DNA转染更快的蛋白表达,且避免基因整合风险。

EZ Trans mRNA转染试剂是一种结合了阳离子聚合物和脂质体优点的转染试剂,协同促进转染复合物进入细胞,随后在胞质中释放,能够在多种细胞类型中实现高效、低毒的转染效果。

订购信息

产品名称

货号

规格

EZ Trans mRNA转染试剂

AC04L061

300 uL

EZ Trans mRNA转染试剂

AC04L062

1 mL

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存,有效期 6 个月;-30℃至-10℃保存,有效期12个月。注:避免反复冻融。

使用方法(以 24 孔板为例,其他培养皿中转染请参考表 1)

1. 接种细胞

对于贴壁细胞:转染前一天,将细胞按照每孔1-2x10^5个细胞的量进行铺板,使其在转染时密度为60%-80% 为佳。

对于悬浮细胞:转染当天,配制转染试剂-核酸复合物之前,用PBS清洗细胞1-2次,用250 μL Opti-MEM I 减血清培养基 (无血清) 重悬细胞,在24孔板中进行细胞铺板,细胞密度为60-80%。

2. 准备转染试剂-mRNA复合物

(1)  对于每孔细胞,将 0.5 μg待转染mRNA加入到1.5mL离心管中,加入2 μL转染试剂与mRNA 混合,室温孵育3 min。

(2)  往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I减血清培养基(无血清),轻轻混匀,在室温下静置30 min,形成转染试剂-核酸复合物。

(3)  30 min后,往上述复合物中加入250 μL Opti-MEM I减血清培养基(无血清),轻轻混匀。

3. 转染细胞

(1)  细胞用PBS清洗1-2次,将上述350µL转染试剂-mRNA复合物加入每孔细胞。

(2)  在 37℃,5% CO2 培养箱培养12 h,无需更换新的培养液,之后即可检测转染效果。若需更长时间转染,可在转染12 h后补充500 μL培养基 (含血清),总体积达到 500μL,即达到常规的培养皿使用培养液的量,12-36 h后再进行检测。

注意事项

1.    本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.    mRNA质量:请务必使用高纯度、无菌、无污染、无内毒素的优质mRNA。可以通过对mRNA进行加帽(相比于Cap0结构,带有Cap1 结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合),使用N1-甲基-假尿苷修饰和添加poly(A)尾,以增强mRNA的稳定性和寿命。

3.    整个实验过程使用无RNA酶和无热原性的材料,如离心管、枪头、缓冲液。

4.    细胞条件:细胞状态会极大影响转染效率,待转染细胞应处于良好生长状态,建议使用生长处于指数期、存活率大于90% 的细胞进行转染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。

5.    细胞培养液要求:EZ Trans mRNA转染试剂转染实验要求采用无血清转染体系(推荐使用Opti-MEM减血清培养基),因为血清会影响复合物的形成及mRNA转染效率。

6.    由于某些特殊培养基中的成分可能会抑制阳离子聚合物介导的转染,因此建议测试这些培养基与本产品的相容性,以确保最佳转染效果。

7.    试剂用量的优化:RNA 浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,初次使用应优化mRNA 浓度和转染试剂用量以得到最大的转染效率。通常情况下,24孔板的推荐mRNA用量为0.2-1 μg,转染试剂推荐用量为2-4 μL。建议初次使用时,可在推荐范围内进行不同用量的预实验,以优化转染效果。

表 1:不同培养体积对应的待转mRNA、 EZ Trans、稀释液用量

培养器皿

培养液体积

(mL)

mRNA 量

(μg )

转染试剂

(μL)

Opti-MEM I培养基a

(μL)

Opti-MEM I培养基b

(μL)

96 孔板

0.1

0.1

0.4

20

50

24 孔板

0.5

0.5

2

100

250

12 孔板

1

1

4

200

500

6 孔板

2

2

8

400

1000

60 mm 培养皿

4

4

16

800

2000

100 mm 培养皿

10

10

40

2000

5000

注:该表使用量仅供参考,具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。a: 稀释转染试剂-mRNA复合物所需培养基的量;b: 加入转染试剂-mRNA复合物的培养基的量。

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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。




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产品参数

供货周期 现货
规格 300uL、1mL
货号 AC04L061、AC04L062
应用领域 生物产业

规格类型

300uL 800元 999件可售
1mL 2200元 999件可售
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